| 研究課題/領域番号 |
08457627
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
武田 純 群馬大学, 生体調節研究所, 助教授 (40270855)
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| 研究分担者 |
泉 哲郎 群馬大学, 生体調節研究所, 助教授 (00212952)
竹内 利行 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (00109977)
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| キーワード | 連鎖解析 / ポジショナルクローニング / MODY3 / 転写因子 / インスリン分泌 |
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| 研究概要 |
若年発症型インスリン非依存性糖尿病(MODY3)は重症の糖尿病を示す場合が多いので、原因遺伝子はインスリン合成や分泌に関与する重要な蛋白をコードすると推測された。そこで、どのような異常がMODY3を惹起するのかを知ることは膵B細胞による血糖調節機構を理解する上で重要であるので、常染色体優性遺伝を示すMODY3遺伝子のpositional cloningを試みた。新たに得られた家系を用いた連鎖解析を繰り返すことによってマップ領域を5cMに狭めた。そして、遺伝子単離の第一段階として、同領域を21個のYACクローンでカバーした。次ぎに、インサートの平均長がより小さいBACとPACクローンを用いてさらに細かく重複連続地図を作成した。これらのクローン群から、エクソントラッピング法、cDNAセレクション法および直接シーケンス法を用いて、40個の遺伝子を検出した。これらは、14個の既知遺伝子、25個のESTおよび5個の偽遺伝子から構成された。この戦略においては、検出された全遺伝子を解析する段階が最も困難である。しかし、我々が別計画で作成中である膵ラ氏島ESTデータベースの情報は40個の遺伝子群から有力候補を効率的に選別することを可能にした。すなわち、これはインスリン分泌不全をきたす原因遺伝子は必ず膵ラ氏島で発現しているという考えに基づく。その結果、膵ラ氏島遺伝子から優先的に解析することによって、転写遺伝子HNF-1αをコードする遺伝子において疾患と連鎖した7種類の遺伝子異常を発見した。これらは、2種類のミスセンス変異、3種類のフレームシフトおよび2種類のmRNAのスプライシング部位の異常であった。これらの遺伝子異常がどのような機構を介して糖尿病を惹起するのか、また、糖尿病全体における頻度についての解析は次年度の課題である。
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