|
研究代表者らはウシにおいて末梢神経ミエリンに特異的な糖蛋白質(PO蛋白質、PAS-II/PMP-22蛋白質)の糖鎖に硫酸化グリクロン酸が存在することを明らかにしているが、この硫酸化グルクロン酸構造が種々の動物のPO蛋白質及びPAS-II/PMP-22蛋白質に普遍的に存在しているかどうかを検討した。その結果、種々の動物(ヒト、サル、ウシ、ブタ、ウサギ、ラット)において普遍的に存在することが明らかとなり、この構造が各蛋白質の機能に必須であることが示唆された。
PO蛋白質はhomophilicな結合をすることが知られているので、PO蛋白質から精製した硫酸化グルクロン酸含有糖鎖をバイオセンサーチップに結合させPharmacia BIAcore装置にて糖鎖間結合の有無を調べたが有意な結合は観察されなかった。また、硫酸化グルクロン酸含有糖鎖をホルミルセルロファイン樹脂に固定化したものを使用してアフィニティークロマトグラフィーも行なったがやはり有意な結合は観察されなかった。
次に、糖鎖とPO蛋白質ポリペプチド間の結合を調べるためにPO蛋白質由来のペプチドとの結合性をアフィニティークロマトグラフィーにて検討した。その結果、硫酸化グルクロン酸を含有しない糖鎖とは結合せず、硫酸化グルクロン酸含有糖鎖とのみ結合するペプチドを1つ得ることが出来た。このペプチドのアミノ酸配列を決定したところ、PO蛋白質のC-末端近傍の配列であることが明らかとなった。興味深いことにこのPO蛋白質の部分配列は硫酸化グルクロン酸に結合することが知られているラミニンの結合部配列と高いホモロジーがあった。従って、PO蛋白質同士のhomophilicな結合は硫酸化グルクロン酸含有糖鎖とポリペプチド間の結合によるものと考えられた。
|
