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1997 年度 研究成果報告書概要

ストレス応答型会合コロイドの調製と高度利用に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 08555183
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 化学工学一般
研究機関大阪大学

研究代表者

久保井 亮一  大阪大学, 大学院・基礎工学研究科, 教授 (40029567)

研究分担者 萬代 治文  (株)村田製作所, 多層商品部, 部長
塩盛 弘一郎  宮崎大学, 工学部, 助手 (80235506)
平井 隆之  大阪大学, 大学院・基礎工学研究科, 助教授 (80208800)
土戸 哲明  関西大学, 工学部, 教授 (50029295)
東 純一  大阪大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (30144463)
研究期間 (年度) 1996 – 1997
キーワードストレス応答 / バイオ分離 / 逆ミセル / パーコレーション / リフォールディング / タンパク質 / 疎水相互作用 / リポソーム
研究概要

環境ストレス条件において細胞・細胞膜・蛋白質等の示す各種のストレス応答機能、例えばストレスタンパク質の生産・輸送、また部分変性した蛋白質の構造復元・構造形成・再活性化(リフォールディング)、選択的な細胞膜透過・放出、不活性凝集体の形成などの機能を、パーコレーション、水性二相分配法、リポソームクロマトグラフィを用いて、様々なレベルから、特に種々のストレス条件下における蛋白質、逆ミセルないしリポソーム間の不安定かつ微弱な相互作用に着目して、定量的に解析した。この結果、生体系におけるストレスタンパク質との相互作用と同様に、逆ミセルや細胞膜モデルであるリポソームがストレス負荷により部分変性した蛋白質と相互作用し不安定な複合構造を形成しており、これが上述のストレス応答機能の発現に重要な役割を果たしていることを明かにした。このような構造形成は逆ミセルやリポソームなどのナノ会合コロイド界面の流動性や、これらと部分変性した蛋白質との間の非定常・不安定な疎水相互作用を駆動力としており、ストレス因子の種類やその組合わせ、またストレス強度により制御できることを明かにした。これらの定量的成果に基づき、逆ミセルやリポソーム、蛋白質等の両親媒性物質が自発的に形成するナノ会合コロイドないしストレス応答型複合材料を調製し、新規かつ高効率の蛋白質のリフォールディングプロセスならびにバイオ分離プロセスの設計開発に成功した。

  • 研究成果

    (15件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (15件)

  • [文献書誌] Ryouichi Kuboi etal.: "Refolding of Carbonic Anhydrase Assisted by 1-Palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3 phospho choline Liposomes," Biotechnol.Prog.13. 828-836 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Ryoichi Kuboi etal.: "Evaluation of Denaturation and Aggregate Formation of Enzyme under Heat Stress Condition." J.Chem.Eng.Japan. 30(6). 1119-1122 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Dong-Pyo,Hong etal.: "Extraction of Proteins and Polymers Using Reversed Micelles and Percolation Process." Korean J.Chem.Eng.14(5). 334-340 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Hiroshi Umakoshi etal.: "Selective Separation Process of Proteins Based on the Heat Stress-Induced Translocation across Phospholipid Membranes." J.Chromatogr.B.711. 111-116 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Makoto Yoshimoto etal.: "Immobilized Liposome Chromatography for Studies of Protein-Membrane Interactions and Refolding of Denatured CAB" J.Chromatogr.B.712. 59-71 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Hiroshi Umakoshi etal.: "Model System for Heat-Induced Translocation of Cytoplasmic β-Galactosidase across Phospholipid Bilayer Membrane." Biotechnol.Prog.14(2). 218-226 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Ryoichi Kuboi, Makoto Yoshimoto, Peter Walde, and Pier Luigi Luisi: "Refolding of Carbonic Anhydrase Assisted by 1-Palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Liposomes" Biotechnol.Prog.13. 828-836 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Ryoichi Kuboi, Katsuhito Yamahara, and Hideyuki Ota: "Evaluation of Denaturation and Aggregate Formation of Enzyme under Heat Stress Condition" J.Chem.Eng.Japan. 30 (6). 1119-1122 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Dong-Pyo, Hong, Ryoichi Kuboi, and Isao Komasawa: "Extraction of Proteins and Polymers Using Reversed Micelles and Percolation Process" Korean J.Chem.Eng.14 (5). 334-340 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Hiroshi Umakoshi, Toshinori Shimanouchi, and Ryoichi Kuboi: "Selective Separation Process of Proteins Based on the Heat Stress-Induced Translocation across Phospholipid Membranes." J.Chromatogr.B. 711. 111-116 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Makoto Yoshimoto, Ryoichi Kuboi, Qing Yang, and Jun Miyake: "Immobilized Liposome Chromatography for Studies of Protein-Membrane Interactions and Refolding of Denatured Bovine Carbonic Anhydrase" J.Chromatogr.B. 712. 59-71 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Hiroshi Umakoshi, Makoto Yoshimoto, Toshinori Shimanouchi, Ryoichi Kuboi, and Isao Komasawa: "Model System for Heat-Induced Translocation of Cytoplasmic b-Galactosidase across Phospholipid Bilayer Membrane." Biotechnol.Prog.14 (2). 218-226 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Hideyuki Ota, Katsuhito Yamahara, and Ryoichi Kuboi: "Stabilization of Enzyme by Using Hydrophobic Ligands" J.Chem.Eng.Japan. 31 (1). 118-122 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Hiroshi Umakoshi, Ryoichi Kuboi, and Isao Komasawa: "Control of Partitioning Behaviors of Bacterial Cells and Characterization of Their Surface Properties in Aqueous Two-Phase Systems" J.Ferment.Bioeng.84 (6). 572-578 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Koichiro Shiomori, Naofumi Ebuchi, Yoshinobu Kawano, Ryoichi Kuboi, and Isao Komasawa: "Extraction Characteristic of Bovine Serum Albumin Using Sodium Bis (2-ethylhexyl) Sulfosuccinate Reverse Micelles" J.Ferment.Bioeng.86 (6). 581-587 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1999-12-08  

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