1997 年度実績報告書

有機溶媒中で働く脂質修飾酵素の開発

研究課題

研究課題/領域番号	08555202
研究機関	東京工業大学
研究代表者	岡畑恵雄東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (80038017)
研究分担者	長谷川幸雄ファルマシアバイオテク(株), 研究開発部, 部長上島孝之ノボノルディスクバイオインダストリー(株), 研究開発部, 主任研究員森俊明東京工業大学, 生命理工学部, 助手 (50262308)
キーワード	脂質修飾酵素 / 有機溶媒中での酵素反応 / 不斉選択合成 / リパーゼ / エステル化反応
研究概要	本研究は、酵素表面を脂質分子で被覆することによりイソオクタンなどの疎水性有機溶媒に可溶化し、有機溶媒中で働く新規な工業プロセス触媒を開発することを目的として行い、以下の成果を得た。 1)リパーゼの水溶液と脂質分子の水溶液を混合し、析出する沈殿を集めた。得られた粉末は酵素の親水性表面が疎水的な脂質分子で被覆されているので、水には溶けず、ベンゼン、イソオクタン、エーテルなどの有機溶媒にのみ可溶となった。設備備品として購入した紫外可視検出器とデュアルポンプを液体クロマトグラフィーに接続して、脂質修飾酵素中のたんぱく含量を測定した。 2)酵素としてリパーゼを選び、脂質修飾リパーゼを作製し、イソオクタンなどの疎水的な有機溶媒中で、1-フェニルエタノールと脂肪酸のエステル化反応を行い、R-体の1-フェニルエタノールのみが不斉選択的にエステル化されることを確かめた。すなわち、脂質修飾リパーゼはエステル化反応を利用してラセミのアルコールを光学分割できる触媒になった。 3)脂質修飾コレステロールオキシダーゼを作製し、有機溶媒中でコレステロールのコレステノンヘの位置選択的酸化反応を行った。従来の水溶液中の反応ではコレステロールの難水溶性のためほとんど反応が進行しないが、有機溶媒中では、高濃度で反応を行うことができた。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] T.Mori, S.Fujita, and Y.Okahata: "Transglycosylation in a two-phase aqueous-organic system with catalysis by a lipid-coated b-D-galactosidase" Carbohydrate Research. 298. 65-73 (1997)
[文献書誌] T.Mori, S.Fujita, and Y. Okahata: "A Facile Transgalactosylation catalyzed by a Lipid-Coated b-D-Galactosidase in the Water-Organic Two Phases" Chem. Lett.73-74 (1997)
[文献書誌] T. Mori and Y. Okahata: "A Variety of Lipid-coated Glycoside hydrolases as Effective Glycosyl Transfer Catalyses in Homogeneous Organic Solvents" Tetrahedron Lett.38. 1971-1974 (1997)
[文献書誌] Y. Okahata and T. Mori: "Lipid-coated Enzymes as Efficient Catalysts in Organic media" Trends in Biotechnology. 15. 50-54 (1997)
[文献書誌] Y. Okahata and T. Mori: "Catalytic Activity of Lipid-coated Enzymes in Organic Media" Proc. Japan Acad.73,Ser.B. 210-214 (1997)
[文献書誌] 森俊明、岡畑恵雄: "日本応用糖質科学会誌" 脂質修飾法を用いる糖加水分解酵素の改変-有機溶媒中での配糖化反応-, 342 (1997)
[文献書誌] 森俊明、岡畑恵雄: "化学と生物" 「有機合成化学で活躍する生体触媒」3.有機溶媒中の均一系生体触媒反応, 666 (1997)

1997 年度 実績報告書

有機溶媒中で働く脂質修飾酵素の開発

研究代表者

岡畑 恵雄 東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (80038017)

研究成果

[文献書誌] T.Mori, S.Fujita, and Y.Okahata: "Transglycosylation in a two-phase aqueous-organic system with catalysis by a lipid-coated b-D-galactosidase" Carbohydrate Research. 298. 65-73 (1997)

[文献書誌] T.Mori, S.Fujita, and Y. Okahata: "A Facile Transgalactosylation catalyzed by a Lipid-Coated b-D-Galactosidase in the Water-Organic Two Phases" Chem. Lett.73-74 (1997)

[文献書誌] T. Mori and Y. Okahata: "A Variety of Lipid-coated Glycoside hydrolases as Effective Glycosyl Transfer Catalyses in Homogeneous Organic Solvents" Tetrahedron Lett.38. 1971-1974 (1997)

[文献書誌] Y. Okahata and T. Mori: "Lipid-coated Enzymes as Efficient Catalysts in Organic media" Trends in Biotechnology. 15. 50-54 (1997)

[文献書誌] Y. Okahata and T. Mori: "Catalytic Activity of Lipid-coated Enzymes in Organic Media" Proc. Japan Acad.73,Ser.B. 210-214 (1997)

[文献書誌] 森 俊明、 岡畑恵雄: "日本応用糖質科学会誌" 脂質修飾法を用いる糖加水分解酵素の改変-有機溶媒中での配糖化反応-, 342 (1997)

[文献書誌] 森 俊明、 岡畑恵雄: "化学と生物" 「有機合成化学で活躍する生体触媒」3.有機溶媒中の均一系生体触媒反応, 666 (1997)

1997 年度実績報告書

岡畑恵雄東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (80038017)

[文献書誌] 森俊明、岡畑恵雄: "日本応用糖質科学会誌" 脂質修飾法を用いる糖加水分解酵素の改変-有機溶媒中での配糖化反応-, 342 (1997)

[文献書誌] 森俊明、岡畑恵雄: "化学と生物" 「有機合成化学で活躍する生体触媒」3.有機溶媒中の均一系生体触媒反応, 666 (1997)