油脂製品の酸化劣化度の定量的評価システムの開発と応用

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08555220
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 二木 鋭雄 東京大学, 先端科学技術研究センター, 教授 (20011033)
• 研究分担者: 野口 範子 東京大学, 先端科学技術研究センター, 助手 (40198578) ; 高橋 希之 東京大学, 先端科学技術研究センター, 助手 (60280955)
• キーワード: 油脂 / 化学発光 / 酸化劣化 / 抗酸化物 / 蛍光分析 / 低比重リポ蛋白質 / 酸素 / 酸素ラジカル

研究概要

油脂、食品などは大気中の酸素、光により酸化され劣化していく。これは物性の変化、品質の低下をもたらし、また安全性に問題を生じる。本研究は油脂、脂質類の酸化を特異的に、かつ高感度で簡便に測定するシステムを開発することを目的としている。また、これらの酸化を抑制する抗酸化物の活性を評価する方法の開発をも目指している。前年度に引き続き、ルミノールを用いた化学発光法による酸化生成物の超高感度分析法の開発に取り組んだ。ストップドフロー化学発光分析システムを開発し、脂質クラスによる応答性の差を明らかにした。高速液体クロマトグラフィーにキラルカラムを応用し、酵素的酸化と、フリーラジカル連鎖的酸化反応を区別することを行った。p,p'-ジフェニルフェニレンジアミンがラジカルと反応することにより、440nmの可視域に強い吸収をもつ生成物を定量的に与えることを利用して、ラジカルの発生およびそのラジカルの抗酸化物による捕捉を簡便に定量化する方法を考案し、いくつかの系、化合物に応用した。これは今後、多くの系に発展、応用することが可能と期待される。不均一系でも高感度で検出、測定でき、かつ画像化することを目指して、ジフェニルピレニルホスフィン(DPPD)の応用について研究を続けた。DPPDはヒドロペルオキシドと量論的に反応してDPPDオキサイドを与える。それは強い蛍光を発するので高速液体クロマトグラフィーにより分析できるばかりでなく、蛍光顕微鏡で画像化することも可能である。低比重リポ蛋白質にとりこませたDPPDが酸化に伴いDPPDオキサイドを与えること、それをとりこんで細胞が蛍光を発することを確認することができた。

研究成果

• [文献書誌] N.Noguchi, and E.Niki et al.: "2,3-Dihyro-5-hydroxy-2,2-dipenty1-4,6-di-tert-butyl-bezofuran : Design and evaluation as a novel radical-scavenging antioxidant against lipid peroxidation." Arch.Biochem.Biophys.342. 236-243 (1997)
• [文献書誌] Y.Kambayashi, S.Yamashita, E.Niki, and Y.Yamamoto: "Oxidation of rat Liver phospholipids : Comparison of pathways in homogeneous solution,in liposopmal suspension and in whole tissue homogenates." J.Biochem.121. 425-431 (1997)
• [文献書誌] H.Kodo, M.Takahashi, and E.Niki: "Peroxynitrite-induced homolysis of human arythrocytes and inhibition by antioxidants." FEBS Lett.413. 236-238 (1997)
• [文献書誌] N.Noguchi, Y.Okimoto, J.Tsucbiya, O.Cynshi, et al.: "Inhibition of oxidatin of low-density lipoprotein by novel antioxidant BO-653 prepared by theoretical design." Arch.Biochem.Biophys.347. 141-147 (1997)
• [文献書誌] N.Noguchi, K.Nishino, E.Washio, H.Shi, J.S.Chen: "Antioxidant action of Ginkgo biloba extract." J.Jpn.Oil Chem.Soc.46. 1481-1488 (1997)
• [文献書誌] N.Noguchi, H.Yamashita, N.Gotoh, Y.Yamamoto, et al: "2,2'-Azobis (4-methoxy-2,4-dimethylvaleronitrile),a new lipid-soluble azo initiator : Application to oxidations of lipids and low density lipoprotein in solution and in aqueous dispersions." Free Rad, Biol.Med.24. 259-268 (1998)
• [文献書誌] E.Niki, and N.Noguchi: "Handbook of Synthetic Antioxidants" Marcel Dekker,NY., 442 (1997)
• [文献書誌] N.Noguchi, and Niki: "Handbook of Synthetic Antioxidants" Marcel Dekker,NY., 442 (1997)