研究課題/領域番号 |
08556055
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研究種目 |
基盤研究(A)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 展開研究 |
研究分野 |
応用分子細胞生物学
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研究機関 | 筑波大学 |
研究代表者 |
村上 和雄 筑波大学, 応用生物化学系, 教授 (70110517)
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研究分担者 |
野村 達次 (財)実験動物中央研究所, 所長 (10072399)
深水 昭吉 筑波大学, 応用生物化学系, 助教授 (60199172)
宮崎 均 筑波大学, 応用生物化学系, 助教授 (40183636)
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研究期間 (年度) |
1996 – 1998
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キーワード | ノックアウトマウス / レニン・アンギオテンシン系 / アンギオテンシンII(IV) / アンギオテンシンII受容体 / アポトーシス / 海馬 / つくば低血圧マウス / 小脳 |
研究概要 |
1.「つくば低血圧マウス」の機能解析 レニン・アンギオテンシン系(RA系)の唯一の基質であるアンギオテンシノーゲン(Agt)遺伝子を欠損し、個体内にRA系が存在しないマウス「つくば低血圧マウス」においては、野性型マウスと比較し、著しい血圧の低下、離乳期までの生存率の減少、腎臓における組織障害の存在が観察された。これら異常所見が遺伝的に回復することが可能であるかを解析するため、マウスメタロチオネイン(MT)・プロモーターとマウスアンギオテンシノーゲンゲノムDNAとを連接させたMT-Agt融合遺伝子を構築し、さらにこの融合遺伝子が導入されたトランスジェニックマウス(MT-Agtマウス)を作製した。その結果「つくば低血圧マウス」で見られた新生仔期の死亡、収縮期血圧、腎臓における組織障害、及びレニン遺伝子の発現増強が正常レベルまで回復していることが示された。 これらのことから「つくば低血圧マウス」で見られた異常所見は、MT-Agt融合遺伝子の導入により正常化し、発現解析および組織学的解析により、循環中のみならず局所におけるRA系もこの正常化に関与している可能性がある。 2.「つくば低血圧マウス」の新しい機能 つくば低血圧マウスの脳内組織について光学顕微鏡を用いて観察した。その結果、つくば低血圧マウスの海馬と小脳において顆粒層の細胞密度の顕著な減少を認めた。このことは「つくば低血圧マウス」がアポトーシスによる細胞死を受けやすいことを示唆している。この海馬の神経培養細胞にアンギオテンシンIIやアンギオテンシンIVを加えることにより、アポトーシスによる細胞死が防げられることを見いだした。この反アポトーシス作用がアンギオテンシンII受容体のI型およびII型の阻害剤の添加によって影響を受けないことから、この作用はアンギオテンシンIVの受容体を介して行われているものと推定した。
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