1996 年度実績報告書

化学物質毒性発現のモニタリング法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	08557030
研究機関	東北大学
研究代表者	藤田博美東北大学, 医学部, 助教授 (60142931)
研究分担者	千葉啓子聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (90197137) 鯨岡徹聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (40130992) 吉田稔聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (80081660) 佐藤浩滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (90090430) 杉田修サントリー(株), 医薬開発研究所, 主席研究員
キーワード	ヘムオキシゲナーゼ / グルクロン酸転移酵素 / シトクロームP450 / ギャップ結合 / 重金属 / ストレス
研究概要	1)基礎的解析:本研究の基礎をなす研究として次のようなことを明らかにした。代表的な酸化ストレス応答蛋白質であるヘムオシシゲナーゼ・ヒト遺伝子では、熱ショック応答を抑制する分子機構が酸化ストレス応答全体を負に調節すること、また本酵素はNO供給試薬により誘導されることから、COとNOの間に情報交換が存在すると考えられる。第二層反応の代表的酵素であるビリルビンUDP-グルクロン酸転移酵素遺伝子の基本転写調節には5'-側上流-113〜-69の領域が必須であること、その間にはE-boxやHNF-1 siteのコンセンサス配列が存在しており、さらに上流にはXRE配列も認められた。これらの配列の機能とヘムオキシゲナーゼの誘導機構との関連の解析が今後重要となるであろう。 2)応用的研究:肝細胞を用いたヘムオキシゲナーゼを指標とした解析は各種薬剤を対象として現在進行中である。シトクロームP-450を指標とする解析の結果は現在投稿中である。一方、腎臓の初代培養細胞を用いた解析では、水銀・カドミウムなどの重金属によりギャップ結合が閉鎖することが見い出された。このギャップ結合の閉鎖は細胞障害に先行して観察されており、従ってこの現象を利用して細胞毒性が顕在化する前の時点で異常を検出することが可能と考えられる。更にこのギャップ結合の閉鎖に機構の解析を進めたところ、細胞内のNOよりもむしろCa^<2+>濃度に依存していることが明らかになった。細胞内Ca^<2+>の異常を引き起こす重金属としては鉛が知られており、今後水銀・カドミウムだけでなく他の重金属毒性についても本現象が細胞毒性の早期指標になる可能性が高いと考えられる。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] S Okinaga, K Takahashi, H Fujita et al.: "Regulation of human hemo oxygenase-1 gene expression under thermal stress" Blood. 87. 5074-5084 (1996)
[文献書誌] E Hara, K Takahashi, H Fujita et al.: "Expression of heme oxygenase and inducible nitric oxide synthase mRNA in human brain tumors" Biochem.Biophys.Res.Comm.224. 153-158 (1996)
[文献書誌] M Nagai, T Nagai, H Fujita et al.: "Novel regulation of heme synthesis in the rat harderian gland" Biochem.Pharmacol.(in press). (1997)
[文献書誌] H Sato, Y Adachi, O Koiwai: "The genetic basis of Gilbert's syndrome" Lancet. 347. 556-557 (1996)
[文献書誌] O Koiwai, S Aono, H Sato et al.: "Crigler-Najjar syndrome type II is inherited both as a dominant and as a recessive trait" Hum.Mol.Genet.5. 645-647 (1996)
[文献書誌] M Yoshida, M Fukumoto, F Arai et al.: "Effect of pretreatment with heavy metals on cytotoxicity of cadmium in primary culture of rat renal proximal tubular cells" Arch.Complex Environ.Studies. 8. 57-63 (1996)
[文献書誌] S Shibahara, K Takeda, H Fujita et al.: "Molecular Biology of Hemetopoiesis 5" Prenum Press, New York, 600 (1996)
[文献書誌] 藤田博美.渡辺知保: "活性酸素とシグナル伝達" 講談社サイエンティフィク、東京, 220 (1996)

1996 年度 実績報告書

化学物質毒性発現のモニタリング法の開発

研究代表者

藤田 博美 東北大学, 医学部, 助教授 (60142931)

研究成果

[文献書誌] S Okinaga, K Takahashi, H Fujita et al.: "Regulation of human hemo oxygenase-1 gene expression under thermal stress" Blood. 87. 5074-5084 (1996)

[文献書誌] E Hara, K Takahashi, H Fujita et al.: "Expression of heme oxygenase and inducible nitric oxide synthase mRNA in human brain tumors" Biochem.Biophys.Res.Comm.224. 153-158 (1996)

[文献書誌] M Nagai, T Nagai, H Fujita et al.: "Novel regulation of heme synthesis in the rat harderian gland" Biochem.Pharmacol.(in press). (1997)

[文献書誌] H Sato, Y Adachi, O Koiwai: "The genetic basis of Gilbert's syndrome" Lancet. 347. 556-557 (1996)

[文献書誌] O Koiwai, S Aono, H Sato et al.: "Crigler-Najjar syndrome type II is inherited both as a dominant and as a recessive trait" Hum.Mol.Genet.5. 645-647 (1996)

[文献書誌] M Yoshida, M Fukumoto, F Arai et al.: "Effect of pretreatment with heavy metals on cytotoxicity of cadmium in primary culture of rat renal proximal tubular cells" Arch.Complex Environ.Studies. 8. 57-63 (1996)

[文献書誌] S Shibahara, K Takeda, H Fujita et al.: "Molecular Biology of Hemetopoiesis 5" Prenum Press, New York, 600 (1996)

[文献書誌] 藤田博美.渡辺知保: "活性酸素とシグナル伝達" 講談社サイエンティフィク、東京, 220 (1996)

1996 年度実績報告書

藤田博美東北大学, 医学部, 助教授 (60142931)