DNA複製、修復系を標的とした新規抗がん剤の探索

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08557131
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 花岡 文雄 大阪大学, 細胞生体工学センター, 教授 (50012670)
• 研究分担者: 掛谷 秀昭 現代学研究所, 抗生物質研究室, 研究員 (00270596) ; 前川 隆文 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助手 (90273721) ; 益谷 央豪 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助手 (40241252) ; 大熊 芳明 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (70192515)
• キーワード: DNA複製 / DNA修復 / 無細胞系 / 阻害剤 / 抗がん剤

研究概要

研究代表者および研究分担者は、DNA複製系および修復系をターゲットとした新規抗がん剤の開発を目指して、以下に述べる研究を行った。
1)既に確立しているSV40 DNAの無細胞複製系(粗抽出液系)および紫外線照射したSV40ミニ染色体を鋳型とする無細胞DNA修復系を用いて、100種以上の放線菌および真菌の培養上清から阻害効果あるいは促進効果を持つものをスクリーニングした。その結果、有意な阻害効果を示すサンプルを複数個、得ることができた。
2)これまでに1)で述べたようにして分離し、精製した新規DNA複製阻害剤であるRK606が、大豆サポニンの一種、soyasaponin IIであること、またこれがSV40ウイルスT抗原の有するDNAヘリカーゼ活性を特異的に阻害することを既に明かにしている。本年度は、無細胞DNA修復系で阻害効果の見られたRK679について、pH3,pH7,pH10での安定性、ブタノール、酢酸エチルによる抽出度などを検討し、酸には比較的安定なこと、ブタノール抽出で有機溶媒層に回収されることを見出した。これらの性質は、同じ培養液から得られたチロシンキナーゼ阻害剤であるGenisteinやDaizeinの挙動と類似していたため、精製されたGenisteinおよびDaizeinの無細胞DNA修復系に対する影響を調べた。その結果、これらのチロシンキナーゼ阻害剤は無細胞複製系に対して弱い阻害活性を示したものの、DNA修復系は阻害しなかった。したがってRK679に見られる修復阻害物質は、チロシンキナーゼ阻害剤とは別の化合物であることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Yokoi,M.et al.: "Molecular cloning of the cDNA for the catalytxc subunit of plane DNA polymarased and its celd-cycle dependent oxpression." Genes to Cells. 2. 695-710 (1997)
• [文献書誌] Masutani,C.et al.: "Idoutification and charactorization of XPC-binding domain of hHR23B." Mol.Cell.Biol.17. 6915-6923 (1997)
• [文献書誌] Sugayawa,K.et al.: "Two human homdyues of Rad23 are functionally interohangeable in complex formation and stimulation of SPC repair activity." Mol.Cell.Biol.17. 6924-6931 (1997)
• [文献書誌] Withers-Ward,E.S.et al.: "Human immunodeficiancy virus type 1 Vpr interacts with HHR23A,acellular protein implicated in nucloocide excision DNA repair" J.Virol.71. 9732-9742 (1997)
• [文献書誌] Ohkuma,Y.: "Multiple furctions of general tronscription factors TFIIE and TFIIH in transcription : Possible points of regulation by trans-acting factors." J.Biochem.122. 481-489 (1997)
• [文献書誌] Osada,H.et al.: "Screaning of cell cycle inhibitors from microbial matabolites by a bioassay using a mouse cdc2 mutant cell line,tsFT210." Bioorg.Med.Chem.5. 193-203 (1997)