| 研究課題/領域番号 |
08558087
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
鈴木 操 熊本大学, 医学部, 助教授 (60253720)
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| 研究分担者 |
辻 正義 九動(株), 企画室, 室長
津久見 清 熊本大学, 医学部, 助手 (60188521)
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| キーワード | Cre / loxp / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス / 相同組換え / 胚凍結保存 / neo耐性マウス |
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| 研究概要 |
変異マウス作成の生命科学研究における有用性に鑑み、本研究では、近い将来共同施設に受け継がれることを期待して、1)変異マウス作成のための応用技術、周辺技術の開発と、2)変異マウス作成の実用化を図った。
1)(a)NF-1,Otx2遺伝子座などについてCreを相同組換えで導入し、コンデショナル変異の問題点を明らかにし、技術開発を行った。
(b)MBPなど各種プロモーターの下でCreを導入し、各種細胞特異的にCreを発現するトランスジェニックスマウスの作成を進めた。
(c)受精卵へのDNA注入によるトランスジェニックマウスの作成を、初心者でも簡単に習得出来るよう、技術のルーチン化を行った。
(d)ES細胞での相同組換えベクター及び相同組換え体同定法の簡便化を行った。
(e)Ctk遺伝子座にneo耐性遺伝子を導入したマウスは、異常を全く示さずfertileで、かつこのマウス胚由来の細胞は高度にneo耐性で、ES細胞培養の為のフィーダー細胞に適していることを明らかにした。
(f)マウス胚の瞬間凍結法、保存法、輸送法を改良した。
2)九動株式会社に対し
(a)受精卵へのDNA注入によるトランスジェニックスマウスの作成
ES細胞の8細胞胚への注入によるキメラマウス作成
を技術指導した。
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