変異マウスの作出、供給と胚バンクの設立

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08558087
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 鈴木 操 熊本大学, 動物資源開発研究センター, 助教授 (60253720)
• 研究分担者: 辻 正義 九動, 企画室, 室長 ; 津久見 清 熊本大学, 医学部, 助手 (60188521)
• キーワード: Cre / loxp / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス / 相同組換え / 胚凍結保存 / 巨大ゲノムDNA / ES細胞

研究概要

昨年度に引き続き変異マウス作成の生命科学研究全般における有用性に鑑み、本研究では近い将来共同利用施設に受け継がれることを期待して、変異マウス作成のための応用技術、周辺技術の開発と、変異マウス作成の実用化を行ってきた。幸い平成12年度からは熊本大学において動物資源開発センターが稼働するので、これ迄の成果は同センターに継承出来る。(1) 技術開発
a) インスレーター配列を導入することによって、トランスジェニックマウスの作製において、導入遺伝子の発現効率を高めることが出来た。
b) 組織特異的なノックアウトマウスを作成するため、種々の特異的に発現する遺伝子のプロモーターの下でCreを発現する、様々なトランスジェニックマウスの作成を進めた。
d) バックベクターを用いる」巨大ゲノムDNAの受精卵への注入による、トランスジェニックマウスの作製効率を検討し、また、同DNAの相同組換えによる遺伝子修飾に成功した。
e) ES細胞での相同組換え体作成効率を大幅に改善し、また、相同組換え体の同定法を簡便なものとした。
f) マウス胚の凍結法、保存法、輸送法の改良を更に進めた。
(2) 技術指導
a) 受精卵へのDNA注入によるトランスジェニックマウスの作成
b) ターゲティングベクターの作製法
c) ES細胞の培養、相同組換え技術
d) 胚盤胞内および8細胞胚への注入によるキメラマウス作成
e) マウス胚の凍結保存および融解法の技術指導を本年度も行った。

研究成果

• [文献書誌] Matsuda,J-I. et al.: "Transgenic mouse expressing a full-length hepatitis C virus cDNA." Jpn. J. Cancer Res.89. 150-158 (1998)
• [文献書誌] Ihara,Y. et al.: "Ectopic expression of N-acetylglucosaminyltransferase III in transgenic hepatocytes disrupts polipoprotein B secretion and induces aberrant cellularmorphology with lipid storage." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 2526-2530 (1998)
• [文献書誌] Sawada,S.et al.: "Disturbed CD4+T cell homeostasis and In Vitro HIV-1 susceptibility in ransgenic mice expression T cell line-tropic HIV-1 receptors." J.Exp.Med.187・9. 1439-1449 (1998)
• [文献書誌] Watanabe,D.et al.: "Ablation of cerebellar Golgi cells disruts synaptic integration involving GABA inhibition and NMDA receptor activation in motor coordination." Cell. 95. 17-27 (1998)
• [文献書誌] Fujii,H. et al.: "Functional dissection of the cytoplasmic subregions of the IL-2 receptor βc chain inprimary lvmphocvte populations." The EMBO Journal. 17. 6551-6557 (1998)