1996 年度実績報告書

DNA高次構造構築に関与する大腸菌遺伝子の検索

研究課題

研究課題/領域番号	08640789
研究機関	九州大学
研究代表者	三木健良九州大学, 薬学部, 助教授 (40037586)
研究分担者	片山勉九州大学, 薬学部, 助手 (70264059)
キーワード	DNA高次構造 / DNAの長さ / 分配 / letB遺伝子 / sopB遺伝子 / 大腸菌 / F因子 / プラスミド
研究概要	本研究の目的と戦略本研究の目的は、大腸菌においてDNAの高次構造体(核様体)構築に関与する遺伝子とその機能を明らかにすることにより、高次構造体構築の分子機構を解明することである。戦略として、大腸菌Fプラスミドの分配過程において、F因子の「セントロメア」incDの領域が、「分配蛋白質」SopBと結合し、「ヌクレオプロテイン構造」を形成するというBiek、Wangらの報告を土台に、この過程に関与する遺伝子を同定するという方法を取ることとした。このため、我々が分離したF因子分配遺伝子sopBの変異letB84が、プラスミドの長さに依存して宿主細胞の増殖を阻害するという現象に注目し、その機構を解明すると共に、この変異を抑圧し得るサプレッサーやマルチコピーサプレッサーを分離し、この過程に関与する遺伝子を同定しその機能を解析することとした。研究成果 (1)F因子分配遺伝子sopB(letB)に変異を持つ場合、プラスミドDNAの長さに依存してプラスミドの脱落が起こること、即ち、プラスミドDNAが長ければ長いほど(>数10μm)プラスミドの脱落が激しく、短ければ短いほど安定に保たれる事を見い出した。この結果は、F因子の分配遺伝子は、分配の際のDNAの長さによる分配阻害を補償する機能、例えばDNAを高次に折り畳む、DNA鎖を細胞内である場所からある場所へ高速で移動させるなどの機能を狙っているものと推測される。プラスミドの安定保持(分配)に、DNAの長さが関与することは、これまで報告のない新しい発見である。 (2)この過程に関与する大腸菌染色体上の遺伝子を検索するため、letB遺伝子の条件致死変異体(高温及び低温感受性)を作製し、これを抑圧し得る大腸菌染色体上のサプレッサー変異株、及びハイコピーサプレッサー活性を持つ組み換えプラスミドを、分離、現在、これらの遺伝子を同定中である。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] MAKI,Satoko.: "Partner switching mechanisms in Inactivatioa and rejuvenatuion of Escherichin coli DNA gyrase by F plasmid proteins LetD(CcdB)and LetA(CcdA)." J.Mol.Biol.256. 473-482 (1996)
[文献書誌] MURAYAMA,Nobuhiro: "Evidence for involvement of Escherichia coli genes pmbA,csrA,and a previously unrecognized gene,tldD,in the control of DNA gyrase by letD(ccdB)of sex factorF." J.Mol.Biol.256. 483-502 (1996)
[文献書誌] OSHIMA,Taku: "A718-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 12.7-28.0 min region on the linkage map." DNA research. 3. 137-155 (1996)
[文献書誌] AIBA,Hiroji: "A570-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 28.0-40.1 min region on the linkage map." DNA research. 3. 363-377 (1996)
[文献書誌] ITOH,Takeshi: "A460-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 40.1-50.0 min region on the linkage map." DNA research. 3. 379-392 (1996)
[文献書誌] HASHIMOTO,Yoshio: "A mutation study of catalytic residue Asp 52 in henn egg lysozyme." J.Biochem.119. 145-150 (1996)
[文献書誌] 北川常広: "薬科微生物学" 丸善株式会社, 244

1996 年度 実績報告書

DNA高次構造構築に関与する大腸菌遺伝子の検索

研究代表者

三木 健良 九州大学, 薬学部, 助教授 (40037586)

研究成果

[文献書誌] MAKI,Satoko.: "Partner switching mechanisms in Inactivatioa and rejuvenatuion of Escherichin coli DNA gyrase by F plasmid proteins LetD(CcdB)and LetA(CcdA)." J.Mol.Biol.256. 473-482 (1996)

[文献書誌] MURAYAMA,Nobuhiro: "Evidence for involvement of Escherichia coli genes pmbA,csrA,and a previously unrecognized gene,tldD,in the control of DNA gyrase by letD(ccdB)of sex factorF." J.Mol.Biol.256. 483-502 (1996)

[文献書誌] OSHIMA,Taku: "A718-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 12.7-28.0 min region on the linkage map." DNA research. 3. 137-155 (1996)

[文献書誌] AIBA,Hiroji: "A570-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 28.0-40.1 min region on the linkage map." DNA research. 3. 363-377 (1996)

[文献書誌] ITOH,Takeshi: "A460-kb DNA sequence of the Escherichia coli K12 geneome corresponding to the 40.1-50.0 min region on the linkage map." DNA research. 3. 379-392 (1996)

[文献書誌] HASHIMOTO,Yoshio: "A mutation study of catalytic residue Asp 52 in henn egg lysozyme." J.Biochem.119. 145-150 (1996)

[文献書誌] 北川常広: "薬科微生物学" 丸善株式会社, 244

1996 年度実績報告書

三木健良九州大学, 薬学部, 助教授 (40037586)