青色光は多くの生物において重要なシグナルとして働き、様々な生命現象を引き起こすことが知られている。しかし、青色光受容体や情報伝達機構などの青色光受容系の分子機構については不明な点が多い。 本研究では、ラン藻Synechocystis PCC6803を用いて、ラン藻の青色光受容系について分子生物学的な解析を行なった。昨年度は、このラン藻から青色光受容系が欠損していると推定される変異株(19株)の分離を行なったが、本年度は、それらの変異株のキャラクタリゼーションを行ない、変異株の相補を指標にした遺伝子のクローニングを試みた。分離した19株のうち、4株が青色光に反応できない変異株であることを確認し、これらの変異株をBlue light insensitive mutants(BliA-Blid)と命名した。BliA変異株は、野性株から調製したゲノムDNAによって相補され、この変異株の相補を指標した遺伝子のクローニングが可能であることが明らかになった。現在、BliA変異株の相補を指標にしたゲノムDNAライブラリーのスクリーニングを進めており、青色光受容系に関与した遺伝子をラン藻から始めてクローニングできるものと期待している。一方、昨年末に高等植物の光屈性に関係した青色光受容体をコードしているものと推測されるNPH1遺伝子がクローニングされた。このNPH1と相同性をもつタンパク質をコードした遺伝子がSynechocystis PCC6803のゲノム中に存在するかどうか検索したところ、12個の遺伝子の存在が明かとなった。そこで、それらの遺伝子のうち、青色光受容体をコードしているのではないかと推定される遺伝子について遺伝子破壊株を作製した。現在、それらの破壊株の青色光に対する応答を調べ、それらの遺伝子が青色光受容体遺伝子であるかどうかについて解析している。
|