プロテインホスファターゼ2Cβ遺伝子の発現制御-精巣特異的発現と多重プロモーター

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08670133
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 田村 眞理 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (20124604)
• キーワード: プロテインホスファターゼ2C / ゲノムDNA / 精巣特異的発現 / 発現制御 / プロモーター

研究概要

PP2CβゲノムDNAのクローニングにより、これまでに8個のエクソンの存在が明らかになった。エクソンIVからエクソンVIIまでにPP2Cβの5つのアイソフォーム(β-1〜β-5)に共通の翻訳領域がコードされていて、エクソンVIIIにPP2Cβ-1に固有の配列と終止コドンが観察された。PP2Cβ-2〜-5のC末端をコードするエクソンはさらに下流に存在するものと考えられる。エクソンIIの上流にはTATAボックスが存在し、性決定に重要な役割を果たす転写因子であるSRYの結合配列、およびNRE(c-mosの精巣以外での転写を阻害する因子)の結合配列が見出された。エクソンIIとその上流より成る7kbpのDNA断片をルシフェレースのレポーター遺伝子の上流に導入し、p19細胞にトランスフェクトしたところ、プロモーター活性が検出された。すでに我々は、RT-PCRによる解析で、エクソンII/III/IVを含む転写産物がマウス成獣の精巣に特異的に発現することを明らかにしている。以上の結果から、今回見出したプロモーター(P2)がPP2Cの精巣における特異的発現を制御するプロモーターであると結論された。

研究成果

• [文献書誌] Kazuyuki Kusuda: "Mutational analysis of domain sturcture of protein phosphatase 2Cβ" Biochem.J.(in press).
• [文献書誌] Takayasu Kobayashi: "Expression of mouse protein phosphatase 2C in Eschericha coli and COS7 cells." Methods Mol.Biol.(in press).
• [文献書誌] Yick Pang Ching: "Specificity of different isoforms of protein phosphatase 2A and protein phosphatase 2C studied using site-directed mutagenesis of HMG-CoA reductase." FEBS Lett.411. 265-268 (1997)