ステロイド受容体各ドメインの遺伝子産物と核内受容体結合蛋白によるシグナル伝達調節

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08670157
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 岡本 一起 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (40177085)
• キーワード: グリココルチコイド / 受容体 / 核結合調節因子群 / ヌクレオソーム / 標的遺伝子

研究概要

リガンド依存性転写調節因子の一つであるグリココルチコイド・レセプター(GR)は、クロマチン上で普遍的転写因子や転写調節蛋白質と複雑な蛋白-蛋白相互作用を行っている。この複雑な蛋白-蛋白相互作用を解析する為には、高度に精製されたGR蛋白質が多量に必要である。GR蛋白質は3つのドメイン、すなわちC末端側のリガンド結合ドメイン、DNA結合ドメイン、N末端側ドメインから構成されている。このうち、N末端側ドメインはGR蛋白の外郭を構成し、種々の核内蛋白質との相互作用に大きく関与していると考えられるが、その正確な働きは不明である。平成8年度は、GR蛋白の各ドメインをコードするcDNAをRT-PCR法を用いてクローニングを行なった。平成9年度は、クローニングしたGR各ドメインcDNAを大腸菌内で発現された。この大腸菌の発現システムでは、蛋白リン酸化等の修飾のない遺伝子産物が得られた。現在、真核細胞の発現システム(バキュロウイルス発現系)を用いて、修飾された遺伝子産物の発現を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Okamoto,K.: "Cloning and Expression Vector of Rat Hepatic Glucocorticoid-Receptor" 3rd International Congress on Vitamins and Related Biofactors. in press. (1998)
• [文献書誌] Suematsu,N.: "Enhancement of Reactivation of Cold-inactivated Acetyl-CoA Hydrolase from Rat Liver Cytosol with Triton X-100" FAOBMB. PR62 (1997)
• [文献書誌] Isohashi,F.: "Interference of Macromolecular-Translocation Inhibitor-III in the Binding of Activated Glucocorticoid-Receptor Complex to Specific DNA." 17th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology. A923 (1997)
• [文献書誌] Shibata,K.: "Cloning of Nuclear Receptor Superfamily Glucocorticoid Receptor cDNA with Polymerase Chain Reaction." 石巻専修大学 研究紀要. 8. 59-64 (1997)
• [文献書誌] Okamoto,K.: "Effect of Macromolecular-Translocation-Inhibitor-III on Binding of Activated Glucocorticoid-Receptor Complex to Specific DNA." J.Biochem.119・5. 920-925 (1996)