| 研究概要 |
著者らはsALS新鮮生検筋組織を用いてL型VGCC binding assayを行い、正常筋組織に比べてdihydropyridineリガンドである(3H)PN200/110のKd低下(親和性亢進)を認めた。この変化はsALS疾患特異的ではないが、脊髄性進行性筋萎縮症などでは認められなかった。Bmaxについては脱神経の程度に比例して増加した。ALSIgGが前角細胞に対してapoptotic processによる細胞障害性を示すか否かを検討するための基礎実験として培養脊髄前角神経細胞(VSC4.1)はDMEM/F12培養液にて7日間培養し、一定の増殖が得られた段階で各濃度cAMP(0.25,0.5,1,2,10mM)を添加しneurite bearing cell%,MTT assayを行った。それぞれneurite bear-ing cell(16.2、25.3、36.3、22.4、18.3%),MTT assay(0.381,0.440,0.441,0.235,0.326,0.396)と1mM cAMPが分化誘導に対する至適濃度と考えられたMAP-2による免疫組織化学にても1mM cAMPがその発現量が最も多く、運動神経誘導への至適濃度であることが確認された。ALS同様の運動神経変性疾患である球脊髄型筋萎縮症のpolyglutamine tract (PGT)を人工的に52,92,132,212と伸張させたfull-length androgen receptorをNG108-15 cellに挿入しtranscriptional activityを検討した。その結果、PGT数が増加するほどtranscriptional activityは低下した。また、AR geneのwild type(CAG=22)とmutant type(CAG=52)をtransfectしたNG108-15 cellの増殖への影響を検討したところ、mutant typeで増殖抑制が見られた。このことより、PGTは神経細胞の分化増殖に関わる因子であると考えられた。
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