Charcot-Marie-Tooth病の病態解明

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08670853
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 山形大学
• 研究代表者: 早坂 清 山形大学, 医学部, 教授 (20142961)
• 研究分担者: 池田 博行 山形大学, 医学部・付属病院, 助手 (80261709)
• キーワード: Charcot-Marie-Tooth病 / Po蛋白 / PNP22 / Connexin32

研究概要

Charcot-Marie-Tooth(CMT)病の大部分の症例、即ちCMT病1型の8割の症例では染色体17p11.2-p12の遺伝子重複が検出される。その為、この遺伝子重複の検出が遺伝子診断の第一歩である。重複を調べる方法にはFISH法、パルスフィールドゲル電気泳動法、サザンブロットハイブリダイゼーション法などがある。しかし、いずれの方法にも問題があり簡便で確実な方法ではない。私達は遺伝子重複の部位に位置する反復配列プローブを利用してサザンブロットハイブリダイゼーションを行い、放射活性をイメージアナライザーで計測するという簡便で確実な診断法を確立した。重複の認められない症例に対しては、SSCP法を用いてPo蛋白、PMP22、Connexin32、P2蛋白の遺伝子変異についてスクリーニングして以下の新しい遺伝子変異を明らかにした。Po蛋白の遺伝子変異の報告は多数認められるが、全ての報告例は変異に関しヘテロ接合体である。しかし、私達はホモ接合体の重症例を見出した。また、Po蛋白のエクソン3のAsp118後に2塩基挿入(重症例)およびGly93Glu(中等度症例)という新しい変異を検出した。PMP22遺伝子変異に関しては、426-427番目の2塩基欠失(未発表)を見出した。このPMP22遺伝子の点変異例は遺伝子重複による症例に比べ、従来の報告の他の点変異例と同様に重症であった。更に、日本の症例では重複例が少なく欧米の報告と異なり、病因不明の症例が多いことが判明した。新しいミエリン蛋白の遺伝子の関与が考えられ、候補遺伝子の解明を始めた。

研究成果

• [文献書誌] Ikegami T,et al.: "A novel homozygous mutation of the myelin Po gene producing Dejerine-Sottas disease (Hereditary motor and sensory neuropathy type III)" Biochem. Biophys. Res. Commun.222:. 107-110 (1996)
• [文献書誌] Ikegami T,et al.: "De novo mutation of the myelin Po gene in Dejerine-Sottas disase (hereditary motor and sensory neuropathy type III) : Two amino acid insertion after Asp 118." Human Mutation. (印刷中).
• [文献書誌] Ikegami T,et al.: "Facilitated diagnosis of the CMT1A duplication in chromosome 17p11.2-12 : analysis with a CMT1A-REP repeat probe and photostimulated luminescence imaging" Human Mutation. (印刷中).
• [文献書誌] Yamamoto M: "Location of crossover breakpoints within the CMT1A-REP repeat in Japanese patients with CMT1A and HNPP." Hum. Genet.(印刷中).
• [文献書誌] Yamamoto M: "Clustering of CMT1A duplication breakpoints in a 700 bp interval of CMT1A-REP determined by polymerase chain reaction" Human Mutation. (印刷中).
• [文献書誌] Ikegami T,Ikeda H ; Hayasaka K,Ishii S;: "Mutation of the Myelin Po Gene in a Pedigree with Charcot-Marie-Tooth Disease" Am. J. Med. Genet.(印刷中).