小児急性リンパ性白血病における癌抑制遺伝子の研究とその臨床への応用

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08670857
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 小林 茂俊 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (70260487)
• 研究分担者: 磯田 貴義 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80272574) ; 渋谷 和彦 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80206151) ; 小林 美由紀 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60205391) ; 林 泰秀 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (30238133) ; 柳澤 正義 東京大学, 医学部・附属病院, 教授 (90049031)
• キーワード: 急性リンパ性白血病 / 癌抑制遺伝子 / サザン解析 / P53遺伝子 / P16遺伝子 / DCC遺伝子

研究概要

近年、9p21領域の遺伝子が単離され(p16/MTS1/CDKN2遺伝子)、多数の癌でホモ接合体欠失(homozygous deleti on,HD)が報告され注目されている。今年度は小児小児急性リンパ性白血病(ALL)におけるp16遺伝子の異常の意義を検討した。T-ALLでは、新鮮白血病56例中26例(46%)、細胞株17株中12株(71%)にp16遺伝子の異常がみられ、このうちHDはそれぞれ22例(39%)、10株(59%)にみられた。これまでT-ALLにおける点変異の報告はなく、我々は4例と2株に点変異を認め、うち2例と2株がnonsense mutationもしくはframe shiftがみられ、最終的にstop codonとなっていた。B前駆型-ALLでは、初診時45例中11例(24%)、再発時22例中5例(23%)、細胞株15株中11株(74%)でHDを認め、これらの症例はHDのない症例と比較して平均年令が高く、WBC高値であったが、予後に有意差はみられなかった。また点変異は、新鮮白血病45例中3例、細胞株15株中2株にみられた。これまでの報告と合わせると、HDを有する症例はWBC高値、DNA indexの近2倍体、tumor bulkと関連するようである。p16遺伝子はT-ALLとB前駆型ALLの発症と進展に何らかの役割を担っているものと思われた。さらに、B-前駆型ALLの中ではt(1;19)-ALLはHDがみられず、Burkitt's lymphomaとALL-L3でもp16遺伝子の異常の頻度は低いと報告されているため、これらの細胞株から蛋白を抽出し、ウエスタンブロッティングでp16遺伝子の発現を検討した。Burkitt's-L3ではHDは7株中2株であったが、発現は11株中9株(81%)でみられなかった。HDがみられなかったt(1;19)-ALL2株中1株で発現の消失がみられた。B-およびc-ALLでp16遺伝子が正常に存在するにもかかわらず蛋白の発現がみれない株が多く、methylationやその他の機序の関与が示唆された。p16遺伝子はリンパ系腫瘍の発症と進展に重要な役割を有すると思われた。

研究成果

• [文献書誌] Tomohiko Taki: "Fusion of the MLL gene with two different genes,AF6 and AF-5α,by a complex translocation involving chromosomes 5,6,8 and 11 in infant leukemia" Oncogene. 13. 2121-2130 (1996)
• [文献書誌] Shigetoshi Kobayashi: "Mutations of the Btk gene in twelve unrelated families with X-linked agammaglobulinemia in Japan:Immunological phenotypes are inconsistent with the location of the mutations" Human Genetics. 97. 424-430 (1996)
• [文献書誌] Hiroaki Ohnishi: "Infreguent mutations of the p53 gene in hepatoblastomas" Gene Chromosomes Cancer. 15. 187-190 (1996)
• [文献書誌] Hiroaki Ohnishi: "Homozygous deletions of p16/HTS1 and p15/MTS2 genes in t(1;19)-negative but not in t(1;19)-positive B precursor acuto lymphoblastic leukemia in chidhood" Leukemia. 10. 1104-1110 (1996)
• [文献書誌] Tomohiko Taki: "Frequency and clinical significance of the MLL gene rearrangemants in infant acute leukemia" Leukemia. 10. 1303-1307 (1996)
• [文献書誌] Kakuda: "A novel human leukaemic cell line,CTS,has a t(6;11) chromosomal translocation and characteristics of pluripotent stem cells" British Journal of Haematology. 95. 306-318 (1996)
• [文献書誌] Yoshiaki Tsuchida: "Genetic clinical markers of human neuroblastoma with special reference to N-myc oncogene:Amplified or not amplitied?-Overview" Tumor Biology. 17. 65-74 (1996)
• [文献書誌] Akira Inoue: "Competitive polymerase chain reaction for the quantification of N-myc gene number in neuroblastoma" Tumor Biology. 17. 262-270 (1996)
• [文献書誌] Atsuhi Ohshima: "11q23 aberation is an additional chromosomal change in de novo acute leukemia after treatment with Etoposide and Mitoxantrone" American Journal of Hematology. 53. 264-266 (1996)
• [文献書誌] Junko Takita: "Deletion map of chromosome 9 and p16 (CDKN2A) gene alterations in neuroblastoma" Cancer Research. 1997年4月(発表予定). (1997)
• [文献書誌] Kohmei Ida: "Detection of chimeric mRNA by reverse transcriptase chain reaction for diagnosis and monitering of acuto leukemi as with 11q23 abnormalities" Medical Pediatric Oncology. (in press).
• [文献書誌] Hirofumi Kobayashi: "Inversion of chromosome 11,inv(11)(p15q22) as a recuring chromosomal aberration associated with dcanovo and secondary myeloid malignancies" Gene Chromosomes Cancer. (in press).