先天性黄胆の遺伝子治療に関する基礎研究

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08670878
• 研究機関: 滋賀医科大学
• 研究代表者: 佐藤 浩 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (90090430)
• キーワード: 先天性黄疸 / クリグラー・ナジャー症候群 / UGT1A1 / ビリルビン / グルクロン酸転移酵素 / 遺伝子治療

研究概要

ビリルビンUDP-グルクロン酸転移酵素欠損症の患者の遺伝子治療を行うにあって、この酵素遺伝子の転写調節領域がどのような性質を持っているかを知ることが重要であると考え、遺伝子の上流域の-3190kbまでの塩基配列を決定した。次に、この領域内でプロモーターとして働いている部位を同定する目的で、種々の長さの上流領域をプロモタ-活性測定用のルシフェラーゼをレポーター遺伝子とするベクターに挿入し、肝癌細胞であるHepG2とHuH-7に作成したベクターをトランスフェクトし、その転写活性を比較検討した。その結果、上流領域の-1362から-1220(DE:distal element)と-113から-70(PE:proximal element)の2ヵ所にプロモーター活性をもつ領域が存在することが明かとなった。PEには塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス型の転写調節因子が結合するE-boxおよび肝臓特異的に遺伝子を発現するためのHNF-1が存在した。DEにはAP-1とCREBの良く似た配列が存在したが、gel mobility-shift assayでは転写因子の結合は証明されなかった。
並行して、本酵素の代謝異常症であるクリグラー・ナジャー症候群とギルバ-ト症候群の患者の遺伝子異常についても将来の遺伝子治療の基礎データとして遺伝子解析を続けている。

研究成果

• [文献書誌] Koiwai,O.: "Crigler-Najjar syndrome type II is inherited both as a dominant and as a recessive trait." Hum.Mol.Genet.5. 645-647 (1996)
• [文献書誌] Sato,H.: "The genetic basis of Gilbert's syndrome." Lancet. 347. 556-557 (1996)
• [文献書誌] Adachi,Y.: "Genetic background of constitutional unconjugated hyperbilirubinemia." Int Hepatol Commun. 5. 297-307 (1996)
• [文献書誌] 佐藤浩: "遺伝性黄疸-Crigler-Najjar症候群とGilbert症候群の遺伝子解析-" Porphyrins. 5. 177-184 (1996)
• [文献書誌] Kamisako,T.: "Mutiplicity of mutation in UDP-glucuronosylktransferase 1^*1 gene in Gilbert's syndrome." Int.Hepatol.Commun.6. 249-252 (1997)
• [文献書誌] 添田陽子: "Gilbert症候群患者におけるビリルビンUDP-グルクロン酸転移酵素遺伝子のTATA boxとコード領域の解析." 滋賀医科大学雑誌. 12. 61-70 (1997)
• [文献書誌] 足立幸彦: "体質性黄疸の分子生物学的研究の進歩" 日本内科学雑誌. 86. 1467-1469 (1997)
• [文献書誌] 上硲俊法: "体質性黄疸の病態と遺伝的背景." 最新医学. 52. 532-542 (1997)
• [文献書誌] Maruo,Y.: "Gilbert's syndrome due to a homozygous mis-sense mutation (Tyr486Asp) of bilirubin UDP-glycuronosyltransferase gene." J.Pediat.(in press).
• [文献書誌] Yamamoto,K.: "Contribution of two missense mutations (G71R and Y486D) of the UGT1A1 gene to phenotypes of Gilbert's syndrome and Crigler-Najjar syndrome type II" Biochim.Biophys.Acta. (in press).
• [文献書誌] Yamamoto,K.: "Mutation analysis of seven patlents with Crigler-Najjar syndrome type II" J.Hum.Genet.(in press).
• [文献書誌] Ueyama,H.: "Analysis of the promoter of bilirubin UDP-glyucuronosyl transferase gene (UGT1^*1) in relevance to Gilbert's syndrome." Hepatol.Res.(in press).