| 研究課題/領域番号 |
08670894
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
香美 祥二 徳島大学, 医学部・附属病院, 講師 (00224337)
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| 研究分担者 |
木戸 博 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (50144978)
黒田 泰弘 徳島大学, 医学部, 教授 (20035471)
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| キーワード | モノクロナール抗体 / 1F3 / インテグリン / 腎炎進展因子 |
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| 研究概要 |
進行性腎炎に共通する腎細胞反応に関連した抗原分子(腎炎進展因子)を同定する為に、ヒト糸球体細胞で免疫したBALB/Cマウスより腎炎組織と特異的に反応するモノクロナール抗体(MAb)、1F3を作製し、1F3が認識する分子の生化学的解析を行うと共に腎炎患者の尿中1F3分子の測定を試み以下の結果を得た。
1)MAb,1F3が認識する腎炎進展因子(1F3分子)の生化学的解析
ヒト単離糸球体を1F3を用いた免疫沈降法で分析した結果、1F3分子は分子量125KDaのポリペプチドであることが判明した。ついで1F3結合immuno-affinity columnにてその1F3分子を精製したあと、膜フィルターに転写し気相シークエンサーにてN末端のアミノ酸配列を分析した。19個のアミノ酸配列が得られ、この結果に基づき既知の分子とのホモロジー検索を行ったところ、1F3分子はヒトインテグリンα3サブユニットのN末端アミノ酸配列に酷似していた。
2)腎炎患者の血液、尿中の腎炎進展因子の質的、量的変化の検索
非侵襲的な腎炎診断法の確立を目的として、腎炎患者から同意を得た上で採取した血液、尿中の1F3分子をELISA法にて測定した。健常人の尿中の1F3分子レベルを正常コント-ロル値とすると、紫斑病腎炎、急性腎炎の尿中には高レベルの1F3分子が排泄されていた。慢性腎炎の代表疾患であるIgA腎症の一部にも有為な1F3分子の排泄増加を確認した。血中の1F3分子は健常人並びに腎炎患者共にELISA法では検出できなかった。今後、腎炎での組織障害の程度と尿中1F3分子レベルとの関係を検討し臨床診断法への応用を目指したい。
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