酸化LDL受容体阻害による新しい粥状動脈硬化治療法の開発

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671157
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 山下 静也 大阪大学, 医学部, 助手 (60243242)
• 研究分担者: 西田 誠 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員 ; 冨山 佳昭 大阪大学, 医学部, 助手 (80252667) ; 野崎 秀一 大阪大学, 医学部, 助手 (30252646)
• キーワード: CD36 / スカベンジャー受容体 / 泡沫細胞 / 粥状動脈硬化 / 酸化LDL

研究概要

動脈硬化の初期病巣に於いては、末梢血単球由来のマクロファージ(Mφ)が血漿リポ蛋白由来の脂質を蓄積して生じた泡沫細胞が集蔟する。Mφの泡沫細胞化の機序として、低比重リポ蛋白(LDL)が内皮下で酸化されて酸化LDL(OxLDL)となり、Mφにより取り込まれ、泡沫化を惹起すると考えられる。その変性LDLの受容体の一つはアセチルLDL受容体であるが、コラーゲンやトロンボスポンジンの受容体と従来考えられてきたCD36が、OxLDLの結合にも関与するとの成績がEndemanらにより最近報告された。私共はCD36欠損症の症例を発見し、その種々の遺伝子異常を解明してきた。また、CD36欠損症症例の単球MφではOxLDLの取り込み及び分解が約50%低下しており、さらにOxLDLとMφを培養した際コレステロールエステルの蓄積が対照に比べて低いこと、ヒトの大動脈の粥状動脈巣で特に内膜のMφにCD36が強く発現することも我々は見出した。従って、CD36はOxLDLの受容体として重要であり、動脈硬化形成過程に関与することが推察される。
そこで、本研究ではCD36の発現に影響する諸因子の同定を試み、さらに、CD36の発現を抑制することによりMφの泡沫化が抑制されるか否かについて検討した。我々はヒト単球由来Mφの培養液にOxLDLを添加すると、CD36の発現がOxLDLの濃度依存性に亢進すること、interferone γによりCD36発現が抑制されることもin vitroで確認した。CD36に対するモノクローナル抗体(OKM5)を用いてOxLDLのCD36への結合を阻害することにより、OxLDLのMφ細胞内への取り込みは有意に抑制された。さらに、今回の研究で培養ヒト大動脈平滑筋細胞においてもCD36が発現することを新たに見出したが、この培養系においてもCD36に対するモノクローナル抗体ならびにCD36へ共有結合する薬物(SSO)はコレステロール蓄積を抑制した。本研究を基盤に、今後CD36を介したMφの泡沫化を防御する薬物をスクリーニングし、動脈硬化の治療法の開発を行う予定である。

研究成果

• [文献書誌] T.Arai,S.Yamashita,et al: "A novel nonsense mutation (G181X) in the human cholesteryl ester transfer protein gene in Japanese hyperalpherlipoproteinemic subject…A common defect affecting plasma high density lipoprotein concentration…" J.Lipid Res.37. 2145-2154 (1996)
• [文献書誌] I.Shimomura,S.Yamashita,et al: "Enhanced expression of PAI-l in visceral fat : possible contributor to vascular disease in obesity." Nature Med. 2. 800-803 (1996)
• [文献書誌] S.Yamashita,et al: "Insulin resistance and body fat distribution." Diabetes Care. 19. 287-291 (1996)
• [文献書誌] T.Funahashi,S.Yamashita,et al: "A compound heterozygote for familial hypercholesterolemia with a homozygous mother." J.Intern.Med.239. 187-190 (1996)
• [文献書誌] T.Arai,S.Yamashita,et al: "A novel nonsense mutation (G181X) in the human cholesteryl ester transfer protein gene in Japanese hyperalpherlipoproteinemic subject---A common defect affecting plasma high density lipoprotein concentration---." J.Lipid Res.37. 2145-2154 (1996)
• [文献書誌] A.Nakata,S.Yamashita,et al: "Localization of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (HB-EGF) in human coronary arteries---Possible roles of HB-EGF in the formation ofcoronary atherosclerosis---." Circulation. 94. 2778-2786 (1996)
• [文献書誌] S.Yamashita,et al: "Drugs Affecting Lipid Metabolism ; Effects of a novel ACAT inhibitor,F-1394,on the progression and regression of atherosclerotic lesions in the aorta of cholesterol-fed rabbits." Kluwer Academic Publishers (Dordrecht/Boston/London), 460 (1996)
• [文献書誌] I.Shimomura,S.Yamashita,et al.: "DiabetesMellitus,Obesity and Hyperlipidemia : Molecular mechanism of visceral fat accumulation." Axel Springer Japan Publishing (Tokyo), 103 (1996)