研究課題/領域番号 |
08671388
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研究機関 | 東京医科大学 |
研究代表者 |
松野 直徒 東京医科大学, 医学部, 講師 (00231598)
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研究分担者 |
長尾 桓 東京医科大学, 医学部, 教授 (90143487)
猪子 英俊 東海大学, 医学部, 教授 (10101932)
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キーワード | SLA / 異種移植 / DN遺伝子 / ミニブタ / TAP遺伝子 / LMP遺伝子 |
研究概要 |
異種移植をめざしたブタの基礎的なデータの集積のためMHC(SLA)領域内に存在する遺伝子のクローニングを行い、現在までにSLA-DNA遺伝子をクローニングすることができた。さらにMHC(SLA)領域内に存在し、クラスI、II抗原の抗原提示に関わっていると考えられるDM、DO、TAP、LMP遺伝子のクローニングを試みた。またクラウンミニブタのサンプルを用いDRB、DQB遺伝子のエクソン2領域の多型解析も行った。すなわちゲッチンゲン系ミニブタ雄3か月齢の脾臓組織よりcDNAライブラリーを作成し、各種プローブおよびプライマーを用いてスクリーニングを行い、塩基配列の決定を行った。また、多型解析を行うため遺伝子特異的プライマーを作成し、PCR法を用いて増幅後塩基配列の決定を行った。その結果、ヒトDNA遺伝子のエクソン3領域をプローブにし、スクリーニングを行い、7つの陽性クローンを分離した。塩基配列を決定した結果、メチオニン開始コドンを含まないcDNAクローンであることが明らかとなったため、5 RACEを行いORFの塩基配列の決定を行っている。多型解析は、現在クラウンミニブタの数個体について検討中である。
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