脳腫瘍遺伝子治療アデノウイルスバクターを利用したインテグリンα_3中和抗体の発現

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671577
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 青木 友和 京都大学, 医学研究科, 助手 (50273454)
• 研究分担者: 宮武 伸一 京都大学, 医学研究科, 講師 (90209916) ; 高橋 潤 京都大学, 医学研究科, 助手 (80252435)
• キーワード: 脳腫瘍 / インテグリン / モノクロナール抗体 / 遺伝子治療

研究概要

我々は、グリオーマ特異的モノクロナール抗体を樹立し、その後、その抗体が認識するタンパク質を精製し、マイクロシークエンス法にて、N末端より25アミノ酸残基を決定した。そして、それがインテグリンα3であることを証明した。そして、human integrinnα3のcDNAで、各種腫瘍組織にて、northern blot 、我々の抗体及び市販の抗体にて、western blot、そして、immunohistochemistryを施行したところ、グリオーマでかなり強く発現しているのを確認した。
我々の樹立したグリオーマ特異的モノクロナール抗体(GA17)は、integrin α3の中和抗体である可能性もあり、現在、in vitroでグリオーマ細胞の接着を阻害しアポトーシスを誘導する。DNAladderingを確認した。
また、northern blotの過程で、インテグリンα3のexpected bandと更に短いバンドが出現した。それは、悪性度とある程度、正の相関を示している。
PCRにて、そのsplice variantと予想しているbandをcDNAより、cloningし、sequenceした。すると、cytoplasmic domainのリン酸化部位がdeletionしており、何らかのシグナル伝達を阻害して、正常の細胞接着を乱し、浸潤能を高めていることを確認した(in submission)。