| 研究課題/領域番号 |
08671761
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
麻酔・蘇生学
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
安藤 富男 横浜市立大学, 医学部, 講師 (00193110)
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| 研究分担者 |
服部 聡 横浜市立大学, 医学部, 助手 (40275037)
川本 進 横浜市立大学, 医学部, 講師 (80125921)
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| キーワード | グルタミン酸受容体 / 麻酔薬 / PC12細胞 / ウイルスベクター / イオンチャネル / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
1分子生物学的研究
LacZ遺伝子をレポーター遺伝子として組み込んだ欠損型ヘルペスウイルスベクターを作成し、PC12細胞、ラット大脳皮質初代培養細胞に感染させ、その感染効率が非常に高く、ウイルスベクター系で問題となる細胞傷害についても感染早期では少ないことを明らかにした。また、AMPA型グルタミン酸受容体とともに重要なグルタミン酸受容体であるNMDA型受容体を組み入れた組換え型ヘルペスウイルスベクター系を構築し、ラット脳初代培養細胞への導入し、発現を確認した。
2電気生理学的研究
1)揮発性麻酔薬の細胞膜への非特異的作用をあらかじめ検討し、揮発性麻酔薬は細胞膜の脂質二重層のイオン透過性を非特異的に増加させ、その程度は麻酔薬、膜脂質の種類により異なるが、大きな増加ではないことを報告した。
2)AMPA型グルタミン酸受容体と類縁のligand-gated ion channelに対する麻酔薬の作用を研究する目的で、PC12細胞の神経型ニコチン様アセチルコリン受容体およびプリンP2x受容体に対する静脈麻酔薬の作用を検討した。その結果、バルビツレート、プロポフォール、ケタミンは、いずれもニコチン受容体を介する応答電流を強く抑制するのに対して、プリンP2x受容体を介する反応はほとんど抑制せず、後者には麻酔薬が高親和性に結合する部位が欠けていると考えられた。
3)NativeのAMPA型グルタミン酸受容体に対するバルビツレートの作用を大脳皮質一次培養ニューロンを用いて検討した。サイオペンタールは臨床濃度で応答電流を抑制するが、麻酔作用を欠き、中枢神経刺激作用をもつバルビツレートも応答電流を抑制することから、AMPA受容体の抑制作用はバルビツレートの麻酔作用には貢献していないと考えられた。
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