子宮内膜癌の発癌・進展過程における遺伝子発現の変異についての研究

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671857
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 藤野 敬史 北海道大学, 医学部, 講師 (20209076)
• 研究分担者: 藤本 征一郎 北海道大学, 医学部, 教授 (60001898) ; 古田 伊都子 北海道大学, 医学部, 助手 (70238682) ; 山田 秀人 北海道大学, 医学部附属病院, 助手 (40220397)
• キーワード: 子宮内膜癌 / 癌遺伝子 / 癌抑制遺伝子

研究概要

子宮内膜癌の発癌・進展課程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした.このために簡便かつランダムにmRNAの差異を比較できるdifferential display法を用いることとした.手術材料の収集と並行して基礎的検討を行った.アスベストあるいはdiethylstibestrolによってトランスホームした造腫瘍性のないSyrian hamster embryo細胞株のうちEGF,PDGF,Insulinの添加条件下でAnchorage-Independentな増殖可能なクローン10Wsup+,DES4sup+と増殖不可能なクローン10Wsup-,DES4sup-との発現の差異の検出を試みた.各細胞株よりmRNAを抽出し4種類のpoly A+側プライマーと20種類のランダムプライマーを用いPCRを行った.PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行いsup+群,sup-群に共通する差異を比較した.sup+群に陽性でsup-群に陰性なバンドをゲルから切り出しDNAを抽出しPCRで増幅した後これをプローブとして各細胞株mRNAのノーザンハイブリダイゼーションを行った.このうち一つのプローブはsup+群に陽性でsup-群に陰性と明瞭な差異が認められたのでこれのシークエンスを行ったところtype2 collagenであった.方法の有効性は確認されたので現在収集中の手術材料による検討を進めてゆく予定である.また,現在シークエンスゲルの非アイソトープによる検出のためジゴキシゲニンなどを用いて検討中である.

研究成果

• [文献書誌] Boyd JA: "Molecular genetic analysis of diethylstilbestrol-associated clear cell adenocarcinomas of the vagina and cervix." Cancer. 77. 507-513 (1996)
• [文献書誌] Tsutsui T.: "Extended lifespan and immortalization of human fibroblasts induced by X-Ray irradiation." Molecular Carcinogenesis. 18. 7-18 (1997)
• [文献書誌] 櫻木 範明: "子宮体癌-診断治療のチェックポイント;子宮体癌と治療上の問題点(予後も含めて)-手術治療-(教室における治療方針と成績)." 産婦人科の実際. 46. 347-354 (1997)
• [文献書誌] 蝦名 康彦: "子宮体癌-診断治療のチェックポイント;子宮癌診断のチェックポイント;腫瘍マーカー." 産婦人科の実際. 46. 313-319 (1997)
• [文献書誌] 晴山 仁志: "子宮体癌に対する手術療法と補助療法の検討." 癌治療学会誌. 32. 115-123 (1997)
• [文献書誌] Ebina Y: "Peritoneal cytology and its prognostic value in endometrial carcinoma." International Surgery. 82(3). 244-248 (1997)
• [文献書誌] 西谷 雅史: "産婦人科治療" 予後を正確に反映した子宮体癌の進行期分類作成の試み., 75(6):673-678 (1997)