老化過程におけるエストロゲンレセプターの量的変化に関する研究

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671866
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 水沼 英樹 群馬大学, 医学部・産科婦人科, 助教授 (10125875)
• キーワード: 骨粗鬆症 / ROS / 子宮内膜癌 / ERmRNA / 定量的PCR法 / ビタミンD_3 / エストロゲンα受容体 / エストロゲンβ受容体

研究概要

微量サンプル中のエストロゲン受容体mRNA(ERmRNA)の測定法を確立し、その有用度をすでに報告した.この測定法を用いてラット骨芽細胞様細胞(ROS17/2.8)培養系を用いてエストロゲン受容体発現の調節機構を検討した.定常状態におけるROS17/2.8中のERmRNA量は5.029±1.632mol/gRNAxlO^<-13>であった.1,25(OH)2D_3添加によりERmRNAの発現は2相性の変化を示した.すなわち、生理的濃度のD_3添加によりERmRNA量は有意の増加を示したが、より大量のD_3添加では逆にERmRNA発現量は減少した.
一方、ER蛋白の発現をWestern Blot法にて検討したところ、ER蛋白の発現はD_3の添加量と用量依存的に増加した.一方、ERmRNA発現に対しエストロゲンは有意の変化を及ぼさなかった.これらの結果から、骨芽細胞におけるERの発現はD_3の影響下にあり、D_3はERmRNAの発現量を増やすばかりか、そのtranscriptionをも増加させることが示された.我々はすでに、閉経女性の骨量減少は2相性に起こることを示し、閉経の初期にはエストロゲン欠落による骨量減少が、また閉経後10数年を経た女性ではカルシウム代謝異常に基づく骨量減少の起こることを示した.今回の我々の結果は高齢女性のホルモン補充療法にはビタミンDを併用することでその骨量予防効果を増強させることをしめす結果と考えられる.
ヒトにおけるERα、βの特異的な内部標準品を作成し、定量的PCRを用いた測定法を開発した.この方法を用いて末梢白血球におけるERα、βmRNAの定量を試み、加齢による変化を検討した.加齢やエストロゲン存在の有無によりERα、βの発現量に差のある傾向が見いだされたが、確定するまでには至っていない.また、ヒト子宮内膜癌においてはERβの発現が見られ、この発現量と予後との関係を検討中である.

研究成果

• [文献書誌] Miyamoto S: "Measurement of PTH/PTHrP Receptor mRNA Using a Competitive Internal Standard." The Kitakanto Medical J. 48(3). 189-196 (1998)
• [文献書誌] Okano H: "The Long-term Effect of Menopause on Postmenopausal Bone Loss in Japanese Women:Results from a Prospective Study." J Bone Mineral Res. 13(2). 303-309 (1998)
• [文献書誌] Liu X: "Effects of Growth Hormone,Activin,and Follistatin on the Development of Preantral Follicle from Immature Female Mice." Endocrinology. 193(5). 2342-2347 (1998)
• [文献書誌] Yokota H: "Diagnostic Difficulties from a Vaginal Foreign Body with a 6-Year Duration." The Kitakanto Medical J. 48(4). 311-314 (1998)
• [文献書誌] Fujiwara S: "Rates of Change in Sponal Bone Density Among Japanese Women." Calcif Tissue Int. 63. 202-207 (1998)
• [文献書誌] Mizunuma H: "Changes in bone mineral density after orchidectomy and hormone replacement therapy in individuals with androgen insensitivity syndrome." Human Reproduction. 13(10). 2816-2818 (1998)
• [文献書誌] Ahmed K: "Comparative study of positron emission tomography and quantitative digital radiography(QDR)in detecting effects of aging and diet on bone metabolism of guinea pig." Radiation Medicine. 16(4). 239-244 (1998)