serpin familyに属する扁平上皮癌抗原によるアポトーシス抑制効果の検討

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671900
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 住浪 義則 山口大学, 医学部・附属病院, 助手 (50253141)
• 研究分担者: 沼 文隆 山口大学, 医学部, 助教授 (80218263)
• キーワード: SCC抗原 / セリン プロテアーゼ インヒビター / アポトーシス

研究概要

serine protease inhibitor(serpin)familyに属する扁平上皮癌関連抗原SCC抗原-1はIL2活性化NK細胞による細胞障害性を抑え、この抑制メカニズムは主にアポートシスの抑制によることが判っているが、このことが同じserpinに属しSCC抗原-1と非常にhomologyの高いSCC抗原-2でも言えるかどうかを検討するために以下の実験をした。
1)SCC抗原産生子宮頸癌培養細胞株SKGIIIaよりRT-PCR法にてSCC抗原-2のcDNAを合成しこれをsense及びantisense方向にretroviral vector(MFG)に挿入した。さらにG418によるselectionをかけるためにinternal ribosomal entry site(IRES)-Neo casetteをその下流に挿入した。
2)amphotropic packaging cell lineであるCRIPにtransfectionした後G418でselectionをかけ高titerのクローンを得た。
現在この培養上清でsense鎖はSCC抗原非産生扁平上皮癌細胞株PCI-51を、一方antisense鎖はSCC抗原産生子宮頸癌培養細胞株SKGIIIaを感染させ、SCC抗原高発現(sense鎖)あるいは抑制(antisense鎖)形質転換細胞を得るべくG418でselection中である。