ヒト胎盤形成及び癌化とゲノムインプリティング

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08671904
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 有馬 隆博 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (80253532)
• 研究分担者: 和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606) ; 加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392) ; 西田 純一 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40264113) ; 加藤 聖子 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (10253527)
• キーワード: ゲノムインプリティング / RLGS法 / IGF2-H19 / 癌抑制遺伝子 / 胞状奇胎 / ヒト絨毛組織 / 絨毛癌

研究概要

1.ヒトインプリント遺伝子の系統的探索:雄核発生である胞状奇胎と正常絨毛組織のDNAを用い、メチル化の相違を利用したRLGS-M法を用い、インプリント遺伝子の単離を行った。これまでに、3種類の制限酵素の組み合わせにより約4,600個のスポットをスクリーニングし、その結果、インプリントの挙動を示すスポット12個見出しクローニングした。全て塩基配列を決定し、ホモロジーサーチをしたところ、3つのスポットは(GNASl、SNRPN、hCGβ)で既にインプリントの証明が報告された遺伝子であった。残る9つのスポットのうち、6つは既知の遺伝子であるが、インプリントの証明がなされておらず、また3つの遺伝子は未だ報告のない未知の遺伝子であった。
2.IGF2-H19インプリンティングの絨毛癌化への関与:絨毛癌では約80%にIGF2-H19のインプリンティングの消失が見られた。また、絨毛癌ではH19の発現の先進と全領域での高メチル化を示した。この結果は、胎児性癌で見られるIGF2-H19の発現パターンと全く逆で、H19遺伝子機能が細胞種により異なることを示唆する。また、H19プロモーター領域の高メチル化にも関わらず、発現の亢進が見られる現象はH19の遺伝子調節に乱れが生じた結果と推測される。実際、プロモーター領域の翻訳開始より上流約300塩基の領域に多数の塩基置換、欠失、挿入を確認した。
3.絨毛癌抑制遺伝子の単離・同定:絨毛癌化に関与するヒト7番染色体上の領域を同定するため、7番染色体上のSTSマーカーを用い、絨毛癌での構造変化を解析した。その結果D7S520及びD7S663領域に高頻度に両側アレルの欠失を認めた。YACに組み込んだSTSマーカーの解析から、共通欠失領域は約1Mbにまで狭小化した。

研究成果

• [文献書誌] Arima T,et al: "Association of IGF2 and H19 imprinting with choriocarcinoma development." Cancer Genet Cytogenet. 93. 39-47 (1997)
• [文献書誌] Mastuda T,et al: "Human chromosome 7 carries a putative tumor suppressor gene(s) involved in choriocarcinoma." Oncogene. 15. 2773-2781 (1997)
• [文献書誌] Wake N,et al: "Genetics of gestational trophoblastic diseases." CME Journal of Gynecologic Oncology. in press.
• [文献書誌] Wake N,et al: "Involvement of IGF2 and H19 imprinting in choriocarcinoma development." FIGO,Journal. in press.
• [文献書誌] Wake N,et al: "Genetics of gynecological cancer-molecular events implicated in trophoblastic neoplasia development." The proceeding of X V FIGO. in press.
• [文献書誌] 有馬隆博 他: "図説産婦人科VIEW" 絨毛生疾患におけるゲノムインプリンティング, 8 (1997)
• [文献書誌] 加藤秀則 他: "癌の臨床" 発癌機序について, 10 (1997)