| 研究課題/領域番号 |
08671905
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 研究機関 | 九州大学 |
|---|
研究代表者 |
加藤 聖子 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (10253527)
|
|---|
| 研究分担者 |
有馬 隆博 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (80253532)
加藤 秀則 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (60214392)
西田 純一 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (40264113)
和氣 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
|
|---|
| キーワード | 卵巣癌 / 運動能 / HGF / HaRF / MAPK |
|---|
| 研究概要 |
今年度は、主に卵巣がん細胞に対するHGFの影響を解析した。
1)まず、各細胞株を無血清培養液で培養し、培養液上清中のHGFの濃度をEIA法で測定したが、HGFの産生は認めなかった。また。細胞よりRNAを抽出後、逆転写酵素によりcDNAに転換後PCRで増幅し、Ras遺伝子(K-、H-)の12,61コドンの変異の有無をdot blot法でスクリーニングしたが、Ras変異の有無と運動能の間に関連は認められなかった。
2)次に、10種類の卵巣癌細胞株の上清中に1,10ng/ml HGFを添加し、細胞の運動能の変化を解析したところ、5株で運動能の亢進を認めた。Western blot法でHGF-Rの発現をみたが、HGF-Rの発現と運動能の亢進の相関はなかった。
3)上記の中で有為に運動能の亢進を認めた2株についてHGF-Rのリン酸化をHGF-Rを免疫沈降法Anti-Phosphotyrosine抗体を用いたWestern blot法で解析したところ、HGF刺激によるチロシンリン酸化の亢進が認められた。
4)また、上記2株におけるHGF刺激下でのMAPKの活性能をAnti-MAPK抗体を用いたWestern blot法で解析したところ、活性化の亢進が認められた。
以上より、卵巣癌細胞の運動能にHGF→HGF-R→MAPKのシグナルが関与しているところが示唆された。
|
