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培養網膜ミュラー細胞単層上に培養することにより、新生児ラットの網膜神経節細胞の長期間生存可能であった。培養網膜神経節細胞は、周辺の網膜細胞に樹状突起を延ばしシナプスを形成していた。この培養系で少くとも31日以上の網膜神経節細胞の生存が確認できた。
虚血の病態生理を研究する目的で、カイニン酸、グルタミン酸、NMDA(N-methyl-DL-aspartic acid)の各興奮性アミノ酸を10から500μMを培養液中に加え、6時間インキュベートしたのち、培養液を変えて24時間後にトレパン・ブルー排泄率から対照群と比較した生存率を算出した。その結果、各興奮性アミノ酸は、濃度依存性に培養網膜神経節細胞に毒性を持つことが示された。また、同時に行った、パッチクランプによる培養網膜神経節細胞の静止膜電位測定の実験においても、同様に各興奮性アミノ酸は濃度依存性に毒性を持つ結果が得られた。
培養網膜神経節細胞を37℃に保温されている密閉した容器に入れ、0%O_2、5%CO_2、95%N_2ガスを6時間灌流させて低酸素状態にして、24時間後にトレパン・ブルー排泄率から対照群と比較した生存率を算出した。その結果、低酸素負荷時も興奮性アミノ酸負荷時と同様の結果が得られた。また、パッチクランプによる培養網膜神経節細胞の静止膜電位測定実験においても、興奮性アミノ酸と同様の毒性を持つ結果が得られた。
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