組織カリクレインファミリーの新しい生理機能と成長因子前駆体のプロッセシング

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08672129
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 細井 和雄 徳島大学, 歯学部, 教授 (10049413)
• 研究分担者: 吉川 大和 徳島大学, 歯学部, 助手 (20274227) ; 金森 憲雄 徳島大学, 歯学部, 助教授 (90064865)
• キーワード: 組織カリクレイン / プロレニン / プロセッシング / 成長因子

研究概要

ICRマウスの唾液腺よりアミノ酸配列において互いにきわめてホモロジーの高い組織カリクレイン,mK1,mK9,mK13,およびmK22を得た.組織カリクレインmK13は以前にプロレニン変換酵素として同定されている.今回EGF結合蛋白質として知られているmK9がRen-2プロレニンを特異的に切断し,mK13の1/10の活性で成熟レニンを与えることを見いだした.同基質蛋白に対してmK22(β-endopetidase)は2種の産物,レニンおよびアルギニルレニンを与えた.しかしmK1(真性組織カリクレイン)はプロレニンを全く限定水解しなかった.
組織カリクレインによる限定水解活性を種々のMCAペプチドを用いて調べた.用いた基質はX(Y)-Arg-Arg,X(Y)-Lys-Arg,およびX-Lys-Lysモチーフを有している(ここでXとYは疎水性および親水性のアミノ酸を示す).本研究でmK1,mK9,およびmK13はY-Arg-Argを除く前二者の構造のペプチドを優先的に切断した.X-Lys-Lys-MCA基質はこれら三種の組織カリクレインによってはほとんど切断されなかったが,mK22によって良く切断された.四種の組織カリクレインは塩基性アミノ酸対を有する前駆体蛋白質をプロセッシングすると考えられた.そして三種の組織カリクレイン(mK1,mK9,mK13)の特異性は互いに類似しているがmK22の特異性とは異なっていた.

研究成果

• [文献書誌] Hosoi,K.: "ATP-and EGF-stimulated phosphatidylinositol synthesis by two different pathways,phospholipase D and diacylglycerol kinase,in A-431 epidermoid carcinoma cells." Biochemistry and Cell Biology. 74(2). 197-209 (1996)
• [文献書誌] Kurihara,K.: "Regulation of Na^+,K^+-ATPase in submandibular glands of hypophysectomized male mice by steroid and thyroid hormones." Jounal of Histochemistry and Cytochemistry. 44(7). 703-711 (1996)
• [文献書誌] Tajima,Y.: "In vivo modulation of proliferating cell nuclear andtigen in growth plate chondrocytes from normal,hypophysectomized,and growth hormone-treated...." Jounal of Histochemistry and Cytochemistry. 44(7). 713-720 (1996)
• [文献書誌] Gresik,E.W.: "The rodent granular convoluted tubular cell-An update." European Journal of Morphology. 34(3). 221-224 (1996)