| 研究概要 |
正常ラット(WKY)大動脈血管平滑筋標本を作製し,まず,その平滑筋輪状標本に対し蛍光カルシウム指示薬Fura-2/AMを負荷する場合の負荷条件(濃度,温度,時間)について検討したところ,10μMFura-2/AMを37℃,暗所にて2時間の負荷が適切であることがわかった.次に,高カリウム,アドレナリンを標本に投与し収縮張力および細胞内カルシウムイオン濃度([Ca^<2+>]_i)変化の同時測定を行った.収縮張力は張力トランスデューサーにより等尺的に測定した.[Ca^<2+>]_iについてはFura-2を負荷した標本に二波長の励起光を照射しそれにより発する組織の蛍光濃度を測定し,その二波長励起蛍光強度比の変化を[Ca^<2+>]_i変化の指標とした.実験の開始時,おのおのの標本に対しまず90mMKCl投与を行い,それにより得られた収縮張力および蛍光強度比の変化量を測定し,それぞれの標本における基準値(100%)とした.
高カリウム(50mMKCl)投与による脱分極刺激により,WKY大動脈血管平滑筋輪状標本に,[Ca^<2+>]_iの増加を伴う収縮張力の増大が見られた.一方,アドレナリン投与では,[Ca^<2+>]_iの増加に比してその際の収縮張力の増加が有意に大きいことが観察された.このことは受容体刺激の際のWKY大動脈血管平滑筋収縮において,[Ca^<2+>]_i感受性の増加があることを示唆する.現在,高血圧自然発症ラット(SHR)の大動脈血管平滑筋の収縮およびその際の[Ca^<2+>]_i動態について実験し,データを蓄積中である.
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