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1997 年度 実績報告書

キャピラリー電気泳動による成人病の高性能遺伝子診断システムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 08672490
研究機関徳島大学

研究代表者

馬場 嘉信  徳島大学, 薬学部, 教授 (30183916)

キーワードキャピラリー電気泳動 / PCR / 遺伝子診断 / がん / 痴呆症 / 心臓病
研究概要

本研究では、PCRと既に開発したCE-LIFシステムの有機的結合によるがん、成人病、痴呆症の高性能遺伝子診断システムの開発および、キャピラリーアレイ電気泳動(CAE)とPCRを結合したシステムによる、多数の遺伝子の変異・多型を同時に検出できる超高性能遺伝子診断システムを開発した。
1.PCR法を用いて、p^<53>がん抑制遺伝子、アポリポ蛋白E遺伝子、アポリポ蛋白B遺伝子等の疾患原因遺伝子を増幅し、既に開発したCE-LIFシステムを用いて解析し、それぞれにおいて、正確、迅速に遺伝子診断を可能にする解析条件を確立した。以上の検討によりCE-LIFとPCRを結合し、CE-LIFの迅速さ、高感度さとPCRの簡便さを兼ね添えたがん、アルツハイマー型痴呆性、心臓病、精神分裂病の高性能遺伝子診断システムを開発した。
2.キャピラリーを並列化してそれぞれのキャピラリーを泳動するDNAを同時に検出できるキャピラリーアレイ電気泳動(CAE)を開発し、成人病・痴呆症の異なる種類の原因遺伝子や様々な臓器から採取したがんの原因遺伝子の多型および変異を同時に検出するための最適条件を検討した。PCRとCAEを有機的に結合したシステムを用いた場合の、がん、成人病、痴呆症の遺伝子診断の速度・再現性・精度などについて検討し、CAEの超高速性とPCRの簡便さを兼ね添えたがん、成人病、痴呆症の超高速遺伝子診断システムを構築した。
これらの成果は、疾患の遺伝子診断を高速化・高精度化する上で重要な貢献をなすものである。さらに今後は、以上の研究成果を基礎に、より高性能の遺伝子診断システムの開発をめざして、CAEのマイクロチップ化のために、シンクロトロン放射光を利用したプロセスにより、超小型化したCAEの試作品を作製しDNAの解析を行う予定である。

  • 研究成果

    (19件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (19件)

  • [文献書誌] M.Ueda: "Is Higher Concentration of Linear Polyacrylamide Not Suitable for the Capillary Electrohporetic Separation of Large DNA?" Anal.Sci. 13・1. 109-112 (1997)

  • [文献書誌] M.Ueda: "Electrophoresis of Long DNA Molecules in Linear Polyacrylamide Solution" Biophys.Chem.(発表予定).

  • [文献書誌] H.Inoue: "Enhanced Separation of DNA Sequencing Products by Capillary Electrophoresis Using Stepwise Gradient of Electric Field Strength" J.Chromatogr.A. (発表予定).

  • [文献書誌] Y.Baba: "Base-Specific Separation of Oligodeoxynucleotides by Capillary Affinity Gel Electrophoresis" Electrophoresis. (発表予定).

  • [文献書誌] A.Nishimura: "Analysis of Variable Number of Tandem Repeat Size of Heart Disease Causing Gene by Capillary Electrophoresis with Laser-Induces Fluorescence Detector" Chem.Pharm.Bull.(発表予定).

  • [文献書誌] Y.Baba: "Simultaneous Genotyping of CETP Gene and TBG Gene by Duplex PCR-RFLP Analysis Using Capillary Electrophoresis" J.Chromatogr.B.(発表予定).

  • [文献書誌] Y.Baba: "Capillary Affinity Gel Electrophoresis: New Tool for Specific Recognition of DNA Sequence and the Mutation Detection of DNA" J.Chromatogr.B.(発表予定).

  • [文献書誌] Y.Baba: "CA Repeat Analysis by Capillary Electrophoresis in Non-denaturing Polymer Solutions." Analyst. (発表予定).

  • [文献書誌] 馬場 嘉信: "遺伝子分析のためのキャピラリー電気泳動法" 臨床検査. 41・5. 569-583 (1997)

  • [文献書誌] 馬場 嘉信: "キャピラリー電気泳動によるヒト・ゲノム解析技術の開発と応用" 医学雑誌. 117・5. 265-281 (1997)

  • [文献書誌] 馬場 嘉信: "マイクロデバイス技術を用いたDNAの超高速分離" 高分子. 46・12. 894-894 (1997)

  • [文献書誌] 馬場 嘉信: "キャピラリー電気泳動によるDNAシークエンシングと遺伝子診断" 医学のあゆみ. 183・4. 285-289 (1997)

  • [文献書誌] 明石 満: "核酸アナローグを用いたキャピラリーアフィニティーゲル電気泳動によるオリゴデオキシヌクレオチドの塩基選択的分離" Jasco Report. 39・2. 37-43 (1997)

  • [文献書誌] 馬場 嘉信: "マイクロマシ-ニングと流れ分析法のマイクロチップ化" J.Flow Injection Analysis. 14・2. 131-140 (1997)

  • [文献書誌] 梅澤 喜夫: "最新の分離・精製・検出法" エヌ・ティー・エス出版, 1039 (1997)

  • [文献書誌] 阿部 正彦: "ゲルテクノロジー" サイエンスフォーラム, 358 (1997)

  • [文献書誌] 長田 義仁: "ゲルトハンドブック" エヌ・ティー・エス出版, 808 (1997)

  • [文献書誌] 井上 晴夫: "分析化学III" 丸善(発表予定),

  • [文献書誌] 木村 彰方: "医療におけるバイオテクノロジー" 医薬ジャーナル(発表予定),

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公開日: 1999-03-15   更新日: 2016-04-21  

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