1996 年度実績報告書

スフィンゴ糖脂質による細胞膜極性の形成機構と生物機能の発現

研究課題

研究課題/領域番号	08672549
研究機関	理化学研究所
研究代表者	平林義雄理化学研究所, 糖細胞情報研究チーム, チームリーダー (90106435)
研究分担者	金森審子理化学研究所, 糖細胞情報研究チーム, 研究員 (00261173)
キーワード	ガングリオシド / スフィンゴ脂質 / グルコシルセラミド
研究概要	糖脂質完全欠損細胞株、GM-95、および欠損酵素グルコシルセラミドの合成酵素遺伝子を導入し再び糖脂質を発現する細胞株を用意することによりスフィンゴ脂質の糖鎖部分の機能解析を試みた。細胞のの形態、増殖性等には、大きな変化を見いだすことができなかった。この結果は、"糖脂質は細胞の生存には関与していない"との考えに一致していた、。しかし、細胞が増殖しコンフルエントに達した時の細胞密度に違いが観察された、細胞間の接着にスフィンゴ脂質糖鎖が関与している可能性が考えられた。中枢神経系には、微量成分を含めると100種以上の構造を異にするシアル酸含有糖脂質ガングリオシドが存在する。申請者は、微量成分ガングリオシドの中からアルカリ不安な成分が存在していることを見いだし、それらの化学構造を決定したところ、b系列に属する一連のガングリオシドの末端シアル酸の9位の水酸基がアセチル化されていた。このO-アセチル化シアル酸を認識する単クローン抗体、D1.l、493D4を使い、発現クローニングによりアセチル基の生合成の関わる因子をコードしているcDNAをクローニングすることに成功した。遺伝子構造を解析したところ、この遺伝子は全く新しいタンパクをコードしていることが判明した。このタンパクは極めて疎水性に富んでおり、複数の(6カ所)の膜貫通領域を有していた。免疫組織学的検索から、小胞体に局在していることが示された。あらゆる組織に広く分布し、且つ進化的にも良く保存されていることから、この遺伝子は機能的に重要なタンパクをコードしていることが予想された。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kanamori.A.Nakayama.J.Fukuda,HN.Fukuda.M.Hirabayashi.Y.: "Expression cloning and characterization of a cDNA encoding a novel membrane protein required for the formation of O-Ac-ganglios. de : A putativo ocetyl cox transporten" proc.Nall.Acad.Sci.U.S.A. (印刷中). (1997)
[文献書誌] Zhang G.,J,Li,Kurono,S.Fujita,Sc.,Furuya S.Hirabayashi.Y.: "Developmentally regulated O-acetylated sialoglycans in CNS revealed by a new monoclonal antibody 493P4 recognizing co de range of O-Ac-glycoconjugates" Glycoconjugate J.(印刷中). (1997)
[文献書誌] Yuki,N.Tagawa.Ire S.Handa S.Hirabayashi: "Close association of Guillain-Barre syndrome with antibodies to minar gangliosides GM lb and GMId" J.Neuroimmunol. (印刷中). (1997)
[文献書誌] Nakayana.J.Fukuda,MN Hirabayashi,Y.Kanamori et al.: "Expression cloning of GT_3 synthase.GD_3 and GT_3 are synthesized by a single enzyme" J.Bcl.Chem.271. 3684-3691 (1996)
[文献書誌] Hidari,K.Ichikawa S Fujita T Sakiyama,H.,Hirabayashi,Y.: "Complete removal of sphingoligids from the plasma membrane disrupts cell-substratum adhesion of mouse melanoma cells" J.Biol.Chem.271. 14636-14641 (1996)
[文献書誌] Ichikawa,S.,Sakiyama,H.,Suzuki,G.Hidari,K.Hirabayashi,Y.: "Expression cloning of a cDNA for human ceramide slucosyltrausfenase that odctalyzes the first slycosylation step of glycosphigolipid synthesis" proc,Natl.Acad.Sci U.S.A.93. 4638-4643 (1996)
[文献書誌] 古屋茂樹、平林義雄: "糖鎖研究の最先端" 福田穣編、羊土社, 15(174) (1996)

1996 年度 実績報告書

スフィンゴ糖脂質による細胞膜極性の形成機構と生物機能の発現

研究代表者

平林 義雄 理化学研究所, 糖細胞情報研究チーム, チームリーダー (90106435)

研究成果

[文献書誌] Kanamori.A.Nakayama.J.Fukuda,HN.Fukuda.M.Hirabayashi.Y.: "Expression cloning and characterization of a cDNA encoding a novel membrane protein required for the formation of O-Ac-ganglios. de : A putativo ocetyl cox transporten" proc.Nall.Acad.Sci.U.S.A. (印刷中). (1997)

[文献書誌] Zhang G.,J,Li,Kurono,S.Fujita,Sc.,Furuya S.Hirabayashi.Y.: "Developmentally regulated O-acetylated sialoglycans in CNS revealed by a new monoclonal antibody 493P4 recognizing co de range of O-Ac-glycoconjugates" Glycoconjugate J.(印刷中). (1997)

[文献書誌] Yuki,N.Tagawa.Ire S.Handa S.Hirabayashi: "Close association of Guillain-Barre syndrome with antibodies to minar gangliosides GM lb and GMId" J.Neuroimmunol. (印刷中). (1997)

[文献書誌] Nakayana.J.Fukuda,MN Hirabayashi,Y.Kanamori et al.: "Expression cloning of GT_3 synthase.GD_3 and GT_3 are synthesized by a single enzyme" J.Bcl.Chem.271. 3684-3691 (1996)

[文献書誌] Hidari,K.Ichikawa S Fujita T Sakiyama,H.,Hirabayashi,Y.: "Complete removal of sphingoligids from the plasma membrane disrupts cell-substratum adhesion of mouse melanoma cells" J.Biol.Chem.271. 14636-14641 (1996)

[文献書誌] Ichikawa,S.,Sakiyama,H.,Suzuki,G.Hidari,K.Hirabayashi,Y.: "Expression cloning of a cDNA for human ceramide slucosyltrausfenase that odctalyzes the first slycosylation step of glycosphigolipid synthesis" proc,Natl.Acad.Sci U.S.A.93. 4638-4643 (1996)

[文献書誌] 古屋茂樹、平林義雄: "糖鎖研究の最先端" 福田穣編、羊土社, 15(174) (1996)

1996 年度実績報告書

平林義雄理化学研究所, 糖細胞情報研究チーム, チームリーダー (90106435)