マメ科植物の根粒内では、根粒菌を細胞内に持つ感染細胞と、それを持たない非感染細胞とが混在しており、それらは遺伝子発現、倍数性、代謝、形態などの点で区別される。本研究では、感染細胞特異的に発現するレグヘモグロビン(Lb)遺伝子に着目し、Lb遺伝子座(約20kb)におけるクロマチン構造の変化を、根粒内の感染細胞と非感染細胞、Lbが発現していない組織由来の細胞、及び、未分化の培養細胞の間で比較し、植物の遺伝子発現における組織及び細胞特異性とクロマチン構造の動的変化との関係について理解を深めることを最終的な目的とした。以下のことが明らかとなった。 1.ダイズのゲノムライブラリーからLb遺伝子座を持つゲノミッククローンを多数単離し、2ヶ所のLb遺伝子座を完全にカバーする詳細な物理地図を作成した。 2.ダイズ培養細胞及び根粒からの核の単離法を確立した。 3.Lb遺伝子座ほぼ全領域が核マトリックスと結合可能であることが示唆された。 4.Lb遺伝子座ほぼ全領域にわたってBURが見出され、上記3.の結果を支持した。 5.ダイス根粒から感染細胞と非感染細胞由来のプロトプラストを分離する技術を確立した。 6.Lb遺伝子座ではメチル化レベルが極めて低いことが明らかとなった。 7.Lbc3遺伝子近傍はDNaseIに対する感受性が発現に関わらず高いことが分かった。 以上から、Lb遺伝子座に特有なクロマチン構造について基礎的なデータを得ることが出来た。その結果は一般に知られるMARの局在性の報告とは異なり、これがLb遺伝子に特有な発現制御機構と関連があるのか明らかにする必要がある。
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