1997 年度実績報告書

4倍体胚会合法を応用した中枢神経系構築におけるHGCの機能解析

研究課題

研究課題/領域番号	08680916
研究種目	基盤研究(C)
研究機関	(財)癌研究会
研究代表者	美野輪治財団法人癌研究會, 癌研究所細胞生物部, 研究員 (00181967)
研究分担者	野田哲生東北大学, 医学部, 教授 (10183550)
キーワード	標的遺伝子組換え / 中枢神経系の構築 / 4倍体会合法 / HGF / SF / 会合キメラ
研究概要	HGF(肝細胞増殖因子)/SFは、種々の組織でその増殖制御に関わるmitogenとしての機能の他に、培養上皮細胞を離散させるmotogenとしての活性や、培養器官芽中の管腔構造形成を促進するmorphogenとしての機能を有するペプチド性因子である。組織学的研究からは、上皮一間充織細胞相互作用を媒介する事により、形態形成に関与すると考えられ、またヒトでは大脳の一部の神経細胞、小脳の神経細胞に強い発現が観察されている。本研究室(癌研細胞生物部)で既に作製されたHGF/SF遺伝子の欠失変異体マウスは、胎生中期(14日)に致死であり、胎生10-14日で胎盤の発生異常をきたした。HGF/SFは胎生中期の胎盤でのtrophoblastの増殖と、恐らくは、そこでのnetwork構造の形成に不可欠である。一方、胎生14日でホモ接合体が致死である事は、これ以降の発生段階におけるHGF/SFの機能の解析が出来ない事を示している。近年独のグループはHGF/SF欠失変異体の胎生中期における末梢神経軸索の微細な形態異常を報告しており、周産期から誕生以降に起きる中枢神経系の構築においても、HGF/SFが重要な機能を持つ事が予想される。本研究は、HGF/SF欠失変異ホモ接合体の胎仔の胎盤異常を、4倍体胚会合法により救済し、14日から誕生までの間に起きる発生後期の中枢神経系の構築におけるHGF/SFの機能を明らかにする事を目的とする。コルヒチン及びサイトカラシンBを利用する方法で、4倍体胚会合法を実施した所、現在までに次の結果が得られた。即ち、PCR法で検討すると、予想出生率より低いもののHGF/SF欠失変異ホモ接合体の出生が確認された。しかし、ホモ接合体は出生後間もなく死亡した。この結果は、GHF/SFが、胎生中期から誕生以降においても生存に必須の役割を担う事を示している。現在こうして得られた出生後数日のHGF/SF欠失変異を用いて、(1)神経細胞とグリア細胞の相互作用における機能、(2)抹消から中枢に到る軸策の進展の制御における機能、(3)及びシナプス結合の形成における機能、に着目して組織学的解析を実施している。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] H.Suzuki, O.Minowa et al.: "A role for macrophage scavenger receptors in atherosclerosis and susceptibility to infection." Nature. 386. 292-296 (1997)
[文献書誌] M.Niki, O,Minowa et al.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor,PEBP2/CBp." Proc.Natl.Acad.Sci.USA,. 94. 5697-5702 (1997)
[文献書誌] A.Terunuma, O.Minowa et al.: "A novel genetic system to isolate a domonant negative effecter on DNA-binding activity of Oct-2." Nucl.Acid Res.,. 25. 1984-1990 (1997)
[文献書誌] Y.Takei, O.Minowa et al.: "Delayed development of nervous system in mice homozygous for disrupted microtubule associated protein 1B(MAP1B) gene." J.Cell Biol.,. 137. 1615-1626 (1997)
[文献書誌] H.Shibata, O.Minowa et al.: "Rapid colorectal adenoma formation initiated by sonditional targeting of the Apc gene." Science,. 278. 120-123 (1997)
[文献書誌] J.Aruga, O.Minowa et al.: "Mouse Zic1 is involved in cerebellar development." J.Neurosci.18. 284-293 (1998)

1997 年度 実績報告書

4倍体胚会合法を応用した中枢神経系構築におけるHGCの機能解析

研究代表者

美野輪 治 財団法人癌研究會, 癌研究所細胞生物部, 研究員 (00181967)

研究成果

[文献書誌] H.Suzuki, O.Minowa et al.: "A role for macrophage scavenger receptors in atherosclerosis and susceptibility to infection." Nature. 386. 292-296 (1997)

[文献書誌] M.Niki, O,Minowa et al.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor,PEBP2/CBp." Proc.Natl.Acad.Sci.USA,. 94. 5697-5702 (1997)

[文献書誌] A.Terunuma, O.Minowa et al.: "A novel genetic system to isolate a domonant negative effecter on DNA-binding activity of Oct-2." Nucl.Acid Res.,. 25. 1984-1990 (1997)

[文献書誌] Y.Takei, O.Minowa et al.: "Delayed development of nervous system in mice homozygous for disrupted microtubule associated protein 1B(MAP1B) gene." J.Cell Biol.,. 137. 1615-1626 (1997)

[文献書誌] H.Shibata, O.Minowa et al.: "Rapid colorectal adenoma formation initiated by sonditional targeting of the Apc gene." Science,. 278. 120-123 (1997)

[文献書誌] J.Aruga, O.Minowa et al.: "Mouse Zic1 is involved in cerebellar development." J.Neurosci.18. 284-293 (1998)

1997 年度実績報告書

美野輪治財団法人癌研究會, 癌研究所細胞生物部, 研究員 (00181967)