1996 年度実績報告書

水溶性キャリヤ-を用いたin vivo遺伝子デリバリーシステム

研究課題

研究課題/領域番号	08680928
研究種目	基盤研究(C)
研究機関	京都工芸繊維大学
研究代表者	村上章京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (60210001)
研究分担者	宮本真敏京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (70149524) 木村良晴京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (10132276)
キーワード	DDS / DEAE / 蛍光異方性 / 遺伝子キャリヤ-
研究概要	本研究はin vitroで高い遺伝子発現を誘導するための構造的要因を明らかにし、これらの知見をin vivoへ応用するための基礎的情報を得ることを目的としている。このための第一の課題は、生体内の通常細胞での遺伝子発現の誘導を可能にする様々な分子構造を有する高分子材料とDNAとの複合体を構築することであり、第二の課題は複合体の生体内移行性の評価である。これまで明らかにした遺伝子発現頻度とキャリヤ-分子の分子構造の関係に基づく新たなキャリヤ-高分子材料として、種々のカチオン基導入率のデキストラン(分子量7万、50万;DEAE-Dex)を合成した。DEAE-Dex自体の毒性をin vitroニュートラルレッド法およびLD50測定法により評価した結果、毒性は分子量よりもカチオン基導入率に依存することが明らかになった。また、DEAE-DexとDNA(一本鎖、二本鎖、いずれも蛍光修飾型)との相互作用形態をカチオン/アニオン比の観点から蛍光スペクトル法(蛍光強度変化ならびに蛍光異方性変化)により評価した。その結果、カチオン/アニオン比が複合体形成の重要な因子であり、またDNAのサイズならびに形状に依存することを見いだした。さらに、蛍光ラベルしたDNA分子(一本鎖)とキャリヤ-分子との複合体を調整し、DNA分子の細胞内移行性を共焦点レーザー顕微鏡により評価した結果、DNAは細胞表面にのみ局在していることが示され、DEAE-Dexの構造の改変の必要性が示唆された。

研究成果

(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] T.Yamagami: "Growth Inhibition of Human Leukemic Cells by WT-1(Wilms Tumore Gene)Antisense Oligonucleotides:Implications for the Involvement of WT-1 in Leukemogenesis" Blood. 87. 2878-2884 (1996)
[文献書誌] 村上章: "アンチセンス法を用いて遺伝子の機能を制御しよう" 化学. 51. 116-119 (1996)
[文献書誌] 村上章: "アンチセンス核酸による治療の基礎" 呼吸. 15. 186-192 (1996)
[文献書誌] 村上章: "アンチセンス研究はどこまで進展したか" 化学と生物. 34. 454-460 (1996)
[文献書誌] K.Yamana: "An oligonucleotide derivative possessing an intercalating dye at sugar residue as an RNA specific fluorescent probe." Nucleic Acids Sympposium Series. 35. 107-108 (1996)
[文献書誌] R.Iwase: "Fluorescent-labeled oligonucleotides for studies on gene structure" Nucleic Acids Symposium Series. 35. 117-118 (1996)
[文献書誌] A.Murakami: "Interaction of Antisense Oligonucleotides with DNA and Proteins Studied by Fluorescence Polarization Spectroscopy" Biotechnologia. 4. 153-166 (1996)
[文献書誌] 村上章: "アンチセンス法-遺伝子に働く医薬品開発の可能性-" 日薬理誌(Folia Pharmacol.Jpn.). 108-1. 18p-23p (1996)
[文献書誌] 村上章: "学会出版センター" バイオ・高分子研究法6 高分子化学と核酸の機能デザイン2.高機能修飾核酸の分子設計, 200 (1996)

1996 年度 実績報告書

水溶性キャリヤ-を用いたin vivo遺伝子デリバリーシステム

研究代表者

村上 章 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (60210001)

研究成果

[文献書誌] T.Yamagami: "Growth Inhibition of Human Leukemic Cells by WT-1(Wilms Tumore Gene)Antisense Oligonucleotides:Implications for the Involvement of WT-1 in Leukemogenesis" Blood. 87. 2878-2884 (1996)

[文献書誌] 村上 章: "アンチセンス法を用いて遺伝子の機能を制御しよう" 化学. 51. 116-119 (1996)

[文献書誌] 村上 章: "アンチセンス核酸による治療の基礎" 呼吸. 15. 186-192 (1996)

[文献書誌] 村上 章: "アンチセンス研究はどこまで進展したか" 化学と生物. 34. 454-460 (1996)

[文献書誌] K.Yamana: "An oligonucleotide derivative possessing an intercalating dye at sugar residue as an RNA specific fluorescent probe." Nucleic Acids Sympposium Series. 35. 107-108 (1996)

[文献書誌] R.Iwase: "Fluorescent-labeled oligonucleotides for studies on gene structure" Nucleic Acids Symposium Series. 35. 117-118 (1996)

[文献書誌] A.Murakami: "Interaction of Antisense Oligonucleotides with DNA and Proteins Studied by Fluorescence Polarization Spectroscopy" Biotechnologia. 4. 153-166 (1996)

[文献書誌] 村上 章: "アンチセンス法-遺伝子に働く医薬品開発の可能性-" 日薬理誌(Folia Pharmacol.Jpn.). 108-1. 18p-23p (1996)

[文献書誌] 村上 章: "学会出版センター" バイオ・高分子研究法6 高分子化学と核酸の機能デザイン2.高機能修飾核酸の分子設計, 200 (1996)

1996 年度実績報告書

村上章京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (60210001)

[文献書誌] 村上章: "アンチセンス法を用いて遺伝子の機能を制御しよう" 化学. 51. 116-119 (1996)

[文献書誌] 村上章: "アンチセンス核酸による治療の基礎" 呼吸. 15. 186-192 (1996)

[文献書誌] 村上章: "アンチセンス研究はどこまで進展したか" 化学と生物. 34. 454-460 (1996)

[文献書誌] 村上章: "アンチセンス法-遺伝子に働く医薬品開発の可能性-" 日薬理誌(Folia Pharmacol.Jpn.). 108-1. 18p-23p (1996)

[文献書誌] 村上章: "学会出版センター" バイオ・高分子研究法6 高分子化学と核酸の機能デザイン2.高機能修飾核酸の分子設計, 200 (1996)