細胞内酸化的損傷のモニタリングシステムを用いた新規抗酸化成分の究明

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08760118
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 村上 明 近畿大学, 生物理工学部, 助手 (10271412)
• キーワード: superoxide / hydroperoxide / HL-60 cells / flow cytometer / chemoprevention / oxidative stress / anti-tumor promoter / leukocyte

研究概要

脂肪酸、あるいはそのエステルなどを用いた従来の抗酸化試験は、溶媒、温度、脂肪酸の種類によって抗酸化活性の評価に再現性や統一性が認められない例も多い。そこで本研究では、細胞内hydroperoxide(ROOH)の産生に対する抑制活性をモニターすることにより、新規抗酸化成分の究明を試みた。HL-60細胞をDMSOにより顆粒球様細胞へと分化させ、発癌プロモーターである12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)によって生成するROOHを蛍光標識し、flow cytometerで解析した。スクリーニングによって抑制活性の認められた野菜類から抗酸化物質を検索したところ、1'-acetoxychavicol acetate(ACA)(Languas galanga、和名:ナンキョウ)、pheophorbite a(Neptunia oleracea、和名:ミズオジギソウ)、AL-1とAL-2(Artemisia latiflora、和名:ヨモギナ)、およびauraptene(Citrus natsudaidai、和名:ナツミカン)が単離できた。以上の化合物は、細胞内NADPH oxidase系の抑制によりsuperoxide産生量を減少させ、その結果ROOH量が低下したものと推察された。これら全ての物質にマウス皮膚癌プロモーション抑制活性が認められたが、さらにACAとaurapteneは、経口投与でも、ラット口腔および大腸発癌を著名に抑制した。以上の研究結果は、細胞内酸化的損傷のモニタリングシステムを用いた評価法が、新規抗酸化物質や発癌抑制物質の究明に極めて有用であることを示すものである。

研究成果

• [文献書誌] Ohnishi,M.: "Chemopreventive effect of a xanthine oxidase inhibitor,1'-acetoxychavicol acetate,on rat oral carcinogenesis" Jpn.J.Cancer Res.87(4). 349-356 (1996)
• [文献書誌] Nakamura,Y.: "Identification of pheophorbide a and its related compounds as possible anti-tumor promoters in the leaves of Neptunia oleracea" Biosci.Biotech.Biochem.60(6). 1028-1030 (1996)
• [文献書誌] Murakami,A.: "1'-Acetoxychavicol acetate,a superoxide anion generation inhibitor,potently inhibits tumor promotion by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate in ICR mouse skin" Oncology. 53. 386-391 (1996)
• [文献書誌] Nakamura,Y.: "Inhibitory effect of pheophorbide a,a chlorophyll-related compound,on skin tumor promotion in ICR mouse" Cancer Lett.108. 247-255 (1996)
• [文献書誌] Makita,H.: "A xanthine oxidase inhibitor 1'-acetoxychavicol acetate inhibits azoxymethane-induced colonic aberrant crypt foci in rats" Carcinogenesis. 18(印刷中). (1997)
• [文献書誌] Murakami,A.: "Auraptene,a citrus coumain,inhibits 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate-induced tumor promotion in ICR mouse skin possibly through suppression of superoxide generation in leukocytes" Jpn.J.Cancer Res.(印刷中). (1997)