RAG遺伝子発現制御に関与するシスエレメントの同定

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08770231
• 研究機関: 富山医科薬科大学
• 研究代表者: 森 啓子 富山医科薬科大学, 医学部, 助手 (50272927)
• キーワード: 遺伝子発現調節 / RAG遺伝子

研究概要

1.ヒトRAG-2遺伝子の構造解析
(1) ヒトRAG-2遺伝子については、これまでに翻訳領域を含むエクソンが同定されていたが、cDNAの構造は不明であった。そこでヒトB細胞株Nalm6よりRNAを抽出し、+263〜+282を第一プライマー、+9〜+28を第二プライマーとして5'RACEを行った。その結果、約120bpの第一エクソンと思われる領域を認めた。
(2)第一エクソンと思われる領域をプローブとして、ヒトリンパ球ゲノムライブラリーをスクリーニングし、ヒトRAG-2遺伝子を単離した。
(3) 単離した遺伝子の塩基配列と、ヒトB細胞株Nalm6ゲノムのサザンマッピングの結果から、ヒトRAG-2遺伝子は2エクソン構造をとること、またヒトRAG-1遺伝子の3'下流にRAG-1遺伝子とは逆向きに存在することが明らかになった。
2.ヒトRAG-2遺伝子プロモーター領域の解析
(1) 異なる長さのプロモーター領域を含む遺伝子を、ルシフェラーゼをレポーター遺伝子としてもつベクターに挿入した。
(2) ヒトB細胞株Nalm6に上記のベクターを導入しルシフェラーゼ活性を測定したところ、-107bpまでの領域が転写に必須であることが確認された。
3.今後の計画
さらにヒトRAG-1ならびにヒト-2遺伝子の発現制御に関与する領域の同定を試みる。

研究成果

• [文献書誌] Taro Kitagawa,Keiko Mori,Hiroyuki Kishi,Hiromi Tagoh,Takuya Nagata,Hideyuki Kurioka,Atsushi Muraguchi: "Chromatin Structure and Transcriptional Regulation of Human RAG-1 Gene" Blood. 88・10. 3785-3791 (1996)
• [文献書誌] Hiromi Tago,Hiroyuki Kishi,Akiou Okumura,Taro Kitagawa,Takuya Nagata,Keiko Mori,Atsushi Muraguchi: "Induction of Recombination Activating Gene Expression in Human Lymphold Progenitor Cell line:Reguiremeny of Two Seporate Signals From Stromet Cells and Cyroines" Blood. 88・12. 4463-4473 (1996)
• [文献書誌] 村口篤、栗岡英行、森啓子、岸裕幸: "RAG遺伝子の発現調節機構" 臨床免疫. 28・12. 1634-1642 (1996)