血管作動性物質によるイオンチャネル制御機構の細胞増殖にともなう変化に関する研究

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08772102
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 村木 克彦 名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (20254310)
• キーワード: 血管 / 培養 / イオンチャネル

研究概要

ラットやウサギ大動脈平滑筋細胞に、ウリジン三燐酸(UTP)やエンドセリン(ET)を投与した時に活性化されるイオンチャネル電流の細胞増殖に伴う変化について検討し、以下の結果を得た。
1 コラゲナーゼ処理により得られたラット大動脈平滑筋細胞にUTP及びETを投与したところ、振動性の内向き電流が活性化された。この電流には主にクロライド電流が関与していた。
2 10%牛血清(FCS)を含む完全培地で、上記細胞を数日間培養しUTP及びETを投与したところ、クロライド電流が活性化された。FCS除去培地で培養した細胞を用いてもほぼ同様な結果が得られた。
以上のことから初代培養平滑筋細胞については、細胞培養に伴うチャネル発現の明確な変化は認められないと考えられる。
一方、ウサギ大動脈由来継代平滑筋細胞株(SM3)やラット大動脈継代平滑細胞を用いて、その培養に伴うチャネル発現の変化についても検討中であるが、これらの細胞にUTPを投与してもクロライド電流は活性化されなかった。少なくとも継代平滑筋培養細胞においては、そのチャネル発現が調整直後の単一細胞のそれと大きく異なっている可能性が示唆された。現在このチャネル発現変化の誘発因子を検索中である。FCS除去培地を用いても同様な結果が得られているので、誘発因子が培養液中の液性因子である可能性は低いと考えられる。
またヒト由来内皮細胞(HET)でも同様な検討を開始したところである。HETに関する実験結果の一部は、現在投稿中である(平成8年度日本脈管作動物質学会で発表済)。

研究成果

• [文献書誌] Henmi S.: "Time course of Ca^<2+>-dependent K^+ and Cl^- currents in single smooth muscle cells of guinea-pig Trachea" Evropean Journal of Pharmacology. 306. 227-236 (1996)
• [文献書誌] K. Muraki: "Effects of OND-1101, a novel Beta-antagonist, on action potential and membrane currents in Cardiac muscle" The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 278. 555-563 (1996)
• [文献書誌] Yasunori Ishii: "Effects ot semaTilide, a novel class III antiarrhythmic agent, on delayed rectitier K^+ current in guinea pig atrial myocytes" Japanese Journal of Pharmacology. 71. 361-365 (1996)
• [文献書誌] K. Muraki: "Larger potentiation of Ca^<2+>-dependend K^+ current than that of voltage -dependent Ca^<2+> current by rsoproterenol and vasoactive mteitinal polypeptide imporcine tracheal・・・" General Pharmacology. (in press). (1997)
• [文献書誌] Yuji Imaizumi: "Smooth muscle excitation" Academic Press, Bolton & Tomita ed,527 (1996)
• [文献書誌] M. Watanabe: "Smooth muscle excitation" Academic Press, Bolton & Tomita ed,527 (1996)