| 研究課題/領域番号 |
08838016
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
老化(加齢)
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
熊崎 努 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (20161698)
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| 研究分担者 |
浜田 勝友 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (00136144)
三井 洋司 工業技術院, 生命工学工業技術研究所, 首席研究官
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| 研究期間 (年度) |
1996 – 1997
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| キーワード | 細胞老化 / フィブロネクチン / プロモーター / 転写因子 |
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| 研究概要 |
我々はこれまでに、フィブロネクチン遺伝子の発現が老化に伴って増加することを明らかにしている。フィブロネクチン遺伝子のプロモーター領域には3つのcAMP responsive element (CRE)の存在が知られており、これがcAMP量の変動のみならず、血清刺激に対する応答にも関与していること、また、恒常的発現にも関与していることが示されている。我々は、これらを含むフィブロネクチン遺伝子の上流約500塩基のプロモータ領域部分について詳細な検討を行い、この領域に存在する10個の転写因子結合部位と思われる配列に結合する蛋白質の幾つかに、老化細胞において結合量が増加するものを見い出した。それは、上述の3つのCREの内CREとしては最も弱い活性を示す-260CREや、TATA boxあるいはAP-2結合部位等に結合する蛋白質に見られた。こうした変化が老化細胞におけるフィブロネクチン遺伝子の発現亢進を導いているかについて検討を加えるために、老化細胞において特異的に結合が増加している蛋白質について調べた。まず、老化細胞のものと若い細胞のものにおける性質の違いについて検討するために、各領域に結合する蛋白質の分離・精製を行った。しかし、検討する領域数が多く、また結合している蛋白質の種類が多いために、且つ結合する蛋白質の量が少ない等、困難が多いために現在も分離・精製に努めている状況である。
一方、老化に伴い発現が増加する他の遺伝子についてもその制御を明らかにするために、そうした遺伝子のクローン化を行った。その内、ミトコンドリアDNAにコードされるNADH脱水素酵素のサブユニット2および3、ATP分解酵素6、そして16SリボソームRNAの4種のRNAの発現が、2種類の血管内皮細胞および2種類の線維芽細胞の老化細胞において高まっていることを明らかにし、発表した。
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