CD40Lで誘導されるアポトーシス関連遺伝子のクローニング

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08839018
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 応募区分: 時限
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 王 継揚 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (80231041)
• キーワード: 抗IgM抗体 / B細胞 / Fasの発現 / アポトーシス / CD40 / CD40L / zinc fingerモチーフ

研究概要

我々は、抗IgM抗体やIL-4の刺激によっては、B細胞でFasの発現は誘導されないが、CD40からのシグナルによってFasの発現が強く誘導されることを見出した。さらに、B細胞のFasによるアポトーシスに対する感受性が、CD40架橋により増強され、抗IgM抗体処理により低下することも見出した。マウス脾臓B細胞を用いてCD40Lで刺激後に、HCP,RIP,PADD及びICEなどのFasによる細胞死に密接に関わっている遺伝子の発現を調べたが、これらの遺伝子の発現とFasに対する感受性の間に相関が見られなかった。また、CD40架橋によってbcl-2,bcd-XL,及びbaxの発現もほとんど変化しなかった。一方、抗体IgM抗体処理によって、bcl-2とbaxの発現は変化しないが、bcl-XLの発現が強く誘導されることを見出した。bcl-XLの発現誘導が、抗原存在下でのB細胞のFas耐性に何らかの役割を果たしている可能性が示唆された。CD40Lで活性化されたB細胞由来のcDNAライブラリーをビオチン化した無刺激脾臓B細胞由来のpoly A^+RNAを用いてsubtractionを行い、スクリーニングした結果、587アミノ酸のopen reading frameをもつ新しい遺伝子を単離した。得られた遺伝子のC末にはDNA結合ドメインと思われる15個のzinc fingerモチーフをもち、N末には酸性アミノ酸に富んだ、転写活性化ドメインに特徴的な構造をもっている。本遺伝子の発現は脾臓B細胞において、CD40架橋によって誘導されることが示された。現在、この遺伝子のB細胞の活性化、Fasの発現誘導及びFasによるアポトーシス、そして記憶B細胞の生成における役割を解明するために研究を進めている。

研究成果

• [文献書誌] J.Wang,I.Taniuchi,et al: "Expression and Function of Fas Antigen on activated murine B cells." Eur.J.Immunol.26. 92-96 (1996)
• [文献書誌] J.Wang,T.Koizumi,and T.Watanabe: "Altered antigen receptor signaling and impaired Fas-mediated apoptosis of B cells in Lyn-deficient mice." J.Exp.Med.184. 831-838 (1996)
• [文献書誌] J.Wang,H.Walker et al: "BP-1 gene : structure,chromosomal localization and regulation of expression by type I interferons and interleukin-7." Genomics. 33. 167-176 (1996)
• [文献書誌] Koizumi,T.,Wang,J.et al: "Regulation of bcl-XL expression and Fas susceptibility in mouse B cellsby CD40 ligation,surface IgM crosslinking and IL-4." Mol.Immunol.(in press). (1997)
• [文献書誌] K.Masuda,J.Wang and T.Watanabe: "Reduced susceptibility to Fas-mediated apoptosis in B1 cells." Immunology. (in press). (1997)
• [文献書誌] D-M Su,J.Wang,O Lin,et al: "Interferons α/β inhibit IL-7 induced proliferation of CD4-8-CD3-(TN)CD44+25+thymocytes,but not block that of TN CD44-25-cells." Immunology. (in press). (1997)