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冬眠特異的蛋白質(HPs)の血中量は、活動期のシマリスで高く、冬眠期のそれではほとんど消失する。活動期のシマリスから確立された初代培養肝細胞では、培養上清中にHPsが見られるが、冬眠中のシマリスから確立された初代培養肝細胞において、HPsが発現するかどうかを確かめた。分散後1日目には発現が見られなかったが、2日目以降培養上清中への分泌量が増加し、7日目には、ほぼ活動期のシマリス由来の細胞と同程度のHPs分泌が観察された。このことから、冬眠中のHPsの発現抑制は継続的な抑制因子の働きかけが必要と考えられ、この因子がなくなれば、抑制が解除されることが予想される。多くの物質の中からシマリス初代培養肝細胞でのHPs発現に影響を与えるものを探す方法の一つとして、既製の神経伝達物質、ホルモン類、サイトカイン類、計38種を培養液に添加し、HPsの培養液中への分泌量をウエスタンブロット法により比較した。その結果、これまでに抑制的に働くことがわかっていたチロキシンに加えて、抑制的に働くものとしてPTH、TSH、プロラクチンが、促進的に働くものとしてテストステロン、コルチコステロン、TRHが新たに見出された。これらのうち特に作用の強いチロキシン(コントロールの1/4以下)とテストステロン(コントロールの2倍以上)を添加した細胞についてノーザンブロット法によりHP-25遺伝子のmRNA量を調べたところ、HPs分泌量の変化はmRNA量の変化によることがわかった。
また、来年度に行う予定の血漿に含まれるHPs発現を調節する因子の検索の準備のため、覚醒中、冬眠中のシマリスの血漿を集めた。
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