T細胞の胸腺内分化を制御する新しい表面分子のクローニング

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08877059
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 高濱 洋介 筑波大学, 基礎医学系, 講師 (20183858)
• キーワード: Tリンパ球 / 細胞分化 / T細胞レセプター / 胸腺 / 単クローン抗体 / 発現クローニング

研究概要

免疫応答における「自己」と「非自己」の認識において中心的役割を担うTリンパ球は、多能性造血幹細胞に由来して、胸腺環境内で成熟する。この時胸腺内では、生体にとって有益な認識特異性を持つT脂肪のみが選ばれて成熟を果たす。この胸腺内でのT細胞成熟と選択に最も中心的な役割を果たす既知の細胞表面分子は抗原レセプター(TCR)である。しかし胸腺においてTCRの発現がどのように制御されているのかをはじめ、TCR構成鎖以外の細胞表面分子による胸腺分化の制御機構はこれまで全くわかっていない。
本研究では、胸腺分化においてT細胞の分化を制御し得る新しい細胞表面分子群を明らかにすることを目的として、これまでに自ら樹立した種々のマウス胸腺細胞株をハムスターやラットに免疫することによって、マウス胎仔胸腺器官培養でのT細胞分化に影響を与えるような単クローン性抗体を選別し、新奇の細胞表面分子を探索した。その結果、新しい単クローン性抗体のひとつは器官培養においてCD4^+CD8^+胸腺細胞上のTCR発現量を上昇させる作用を示すことが明らかになった。この抗体の認識する分子は約40kDのGPI-tailを持ったタンパク質で、CD4^+CD8^+胸腺細胞に高く発現されるが末梢T細胞には発現されていなかった。その発現分布の詳細と生化学的性状から、この分子は既知のGPIアンカー分子とは異なった新しい分子であると考えられた。現在、この新しい細胞表面分子の遺伝子を明らかにすべく、マウス胸腺細胞株のcDNAライブラリーをβアクチンプロモーターによる発現ベクターを用いて作製し、COS7細胞を用いて発現クローニングを行っている。また、他にもいくつかマウス胸腺器官培養においてT細胞分化に影響を与える単クローン性抗体を得ており、更に新しいT細胞分化制御分子を明らかにしていく予定である。

研究成果

• [文献書誌] M.Sheard: "Heterogeneous expression of recombinase activating genes and surface CD5 in CD3^<low>CD4^+CD8^+ thymocytes." Scandinavian Journal of Immunology. 43. 619-625 (1996)
• [文献書誌] K.Toyooka: "CD28co-stimulatory signals induce IL-2 receptor expression on antigen-stimulated virgin T cells by an IL-2-independent mechanism." International Immunology. 8. 159-169 (1996)
• [文献書誌] S.Tsuda: "IL7 supports D-J but not V-DJ rearrangement of T cell receptor β gene in fetal liver progenitor cells." Journal of Immunology. 156. 3233-3242 (1996)
• [文献書誌] Y.Tokoro: "CD3-induced apoptosis of CD4^+CD8^+ thymocytes in the absence of clonotypic T-cell antigen receptor." European Journal of Immunology. 26. 1012-1017 (1996)
• [文献書誌] Y.Takahama: "Phorbol ester and calcium ionophore can replace TCR signals that induce positive selection of CD4 T cells." Journal of Immunology. 157. 1508-1513 (1996)
• [文献書誌] S.Sagara: "B220 expression by Tlymphoid progenitor cells in mouse fetal liver." Journal of Immunology. 158. 666-676 (1997)