関節リウマチの滑膜細胞増殖情報伝達機構解明とその制御によるアンチセンス療法開発

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08877084
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 北島 勲 鹿児島大学, 医学部, 助教授 (50214797)
• 研究分担者: 丸山 征郎 鹿児島大学, 医学部, 教授 (20082282)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / 滑膜細胞 / 骨芽細胞 / アポトーシス / NF-_KB / AP-1 / HVJ-リポソーム法 / アンチセンス療法

研究概要

慢性関節リウマチ(RA)患者由来の滑膜細胞と骨芽細胞における腫瘍壊死因子(TNF)による細胞増殖とそのシグナル伝達を解析した。その結果、高濃度(500U/ml)TNFの存在下では、骨芽細胞の細胞増殖は抑制され最終的にはアポトシスが誘導された。一方、滑膜細胞は強い増殖を示した。転写因子活性をゲルシフト法で検討すると、滑膜細胞は非刺激時でNF-_KBが活性化をうけており、骨芽細胞はAP1活性が認められた。アンチセンスNF-_KB,アンチセンスc-junの処理により、NF-_KB活性化はTNF-α刺激による細胞死に対して抑制的に作用していることが明らかになった。また、RAに対するアンチセンス療法を開発するため、アンチセンス核酸やリボザイムを滑膜細胞に導入する方法として、不活性型センダイウイルス(HVJ)-リポソーム法を検討した。その結果、培養細胞において、従来のアニオン型よりもHVJ-カチオン型リポソーム法が細胞内導入効率が高いことが判明した。さらに、本方法を用いてHTLV-I tax mRNA切断リボザイムにより,HTLV-I型関節症の滑膜細胞増殖を抑制することに成功した。以上、当初予定した実験をすべて終了し、滑膜細胞における転写因子の役割と遺伝子治療に対する遺伝子導入法の検討により、期待すべき成果を得ることができた。

研究成果

• [文献書誌] Isao Kitajima Naohiro Hanyu et al.: "Ribozyme-based gene cleavage approach to chronic arthritis associated with human T-cell leukemia virus type I(HTLV-I)" Arthritis & Rheumatism. 40. 2118-2127 (1997)
• [文献書誌] Isao Kitajima Naohiro Hanyu et al: "Efficient transfer of synthetic ribozymes into cells using hemagglutinating virus of Japan (HVJ) cationic liposomes." J.Biol.Chem.272. 27099-27106 (1997)
• [文献書誌] Gen Yamada,Isao Kitajima et al.: "Metal composition and histological analysis of the space flight rat bones" Life Science. 60. 635-642 (1997)
• [文献書誌] Jun-Ichirou Nishi Isao Kitajima,et al.: "B cell epitope mapping of the bacterial superantigen staphylococcal enterotoxin B" J.Immunol.158. 247-254 (1997)
• [文献書誌] Kimiyoshi Arimura Isao Kitajima,et al.: "Antibodies to potassium channel of PC12in serum of Isaacs'syndrome" Muscle & Nurve. 20(3). 299-305 (1997)
• [文献書誌] Mika Okamoto Isao Kitajima: "HIV-1-infected myelomonocytic cells are resistant to Fas mediated apoptosis" Medical Microbiology and Immunology. 186. 11-17 (1997)
• [文献書誌] 北島勲: "エンドトキシンのシグナル伝達(DIC ology)" メディカルレビュー社, 145-153 (1997)
• [文献書誌] Ikuro Maruyama Isao Kitajima et al.: "Thrombin activates NF-kB through thrombin receptor" Recent Progress in Blood Coagulation and Fibrinolysis ELSEVIER,Amsterdam, 161-167 (1997)