| 研究概要 |
肺移植の需要は増加しているが,長時間保存の困難さもありその成績は満足できるものではない。本研究ではこれまで行われてきた肺保存研究に新たに分子生物学的手法を導入し,第一段階の萌芽的研究として保存時の肺組織中antioxidant enzymeのgene expressionについで検討するのが目的である.実験動物としてSpraugue-Dawley雄ラットを用い、ペントパルビタール麻酔下に気管切開を行って人工呼吸管理とした.ついて胸骨縦切開により肺を露出し、低カリウムリン酸緩衝液(Potassium buffered saline (PBS) ; K=20mM)で摘出時初回灌流を行った.灌流後標準UW液にて冷保存(4℃)を行うが,保存時間により実験群を以下の4群に分ける. 1)12時間保存群(n=5), 2)18時間保存群(n=5), 3)24時間保存群(n=5), 4)保存なし(対照群) (n=5).平成8年度は上記実験群1、4の一部を行い組織を-80℃凍結保存した.今後Chomczynski and Saachi法にてRNAを組織から抽出して,Northern blot hybridization analysisを行い,antioxidant enzymeとして,SOD,カタラーゼ,およびグルタチオン還元酵素のmRNAの測定を行う予定である.
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