血液脳関門をマトリックスの分子構築として理解する試み

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08877223
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 二宮 善文 岡山大学, 医学部, 教授 (70126241)
• 研究分担者: 百田 龍輔 岡山大学, 医学部, 助手 (80263557) ; 大橋 俊孝 岡山大学, 医学部, 助手 (50194262)
• キーワード: 血液脳関門 / アストロサイト / 血管内皮細胞 / 基底膜 / 細胞外マトリックス / IV型コラーゲン

研究概要

本研究は、選択的透過性を有する脳血液関門がアストロサイトから分泌されるシグナルによって、基底膜を産生する内皮細胞に影響を及ぼし、脳以外の毛細血管周囲基底膜と異なる分子構成による超分子会合体が作り上げられているという考えに基づいて、血液脳関門の本能が細胞外マトリックス分子と細胞間の相互作用で説明することにある。具体的に以下の結果を得た。
1)脳毛細血管と脳以外の毛細血管(腸間膜)よりRNAを抽出した。これを無細胞系のタンパク翻訳を行うと、多くのポリペプチドが共通のバンドとして認識されるが、一方で、確かにいくつかのペプチドが異なっていることがわかった。これらのバンドが異なる超分子会合体を構成している可能性がある。
2)ヒト脳毛細血管と脳以外の毛細血管について、α1(IV)-α6(IV)コラーゲン鎖に対する特異的モノクローン抗体を用いて蛍光染色すると、α1(IV)鎖とα2(IV)鎖の存在が明らかになった。脳毛細血管と脳以外の毛細血管について、α(IV)鎖の分布の差は特に認められなかったが、現在さらに詳細の解析を行っている。
3)脳毛細血管と脳以外の毛細血管より抽出したRNAを鋳型にして、種々のプライマーを用いてDifferential display法を行い、いくつかの異なるバンド認められたので、現在これらをクローニングしている。

研究成果

• [文献書誌] Sugihara K.: "Experimental Anti-GBM glomerular nephritis induced in rats byimmunization with syhthetic peptides based on six a chains of human type IV collagen." J.Pathol.178. 352-358 (1996)
• [文献書誌] Ljubimov A.V.: "Extracellular alterations in human corneas with bullous keratopathy." Invest.Ophthal mol.Vis.Sci.37. 997-1007 (1996)
• [文献書誌] Rauf S.: "Nephritogenicity and a-chain composition of NCl fractions of type IV collagen from bovine renal basement membrane." Virchow Archiv. 428. 281-288 (1996)
• [文献書誌] Hino S: "Absence of α6(IV)collagen in kidney and skin of X-linked Alport syndrome." Pediatric Nephrology. 10. 742-744 (1996)
• [文献書誌] Ljubinov,AV: "Basement membrane abnormalities in human eye with diabetic retinopathy." J.Histochem.Cytochem.44. 1469-1479 (1996)
• [文献書誌] Megumi Kagawa: "Epitope-defined monoclonal antibodies against type-IV collagen for diagnosis of Alport's syndrome." Nephrology Dialysis Transplantation. (in press). (1997)
• [文献書誌] Glew R.H.and Ninomiya Y.: "Clinical Studies in Medical Biochemistry," Oxford University Press,New York(in press), 1〜449 (1997)
• [文献書誌] 二宮善文,渡辺明治,岡崎勲: "遺伝子とその発現 細胞外マトリックス-臨床医学への応用-" メヂカルレビュー社, (1996)