排卵に関わるプロテアーゼカスケード系の再検討

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08878095
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 高橋 孝行 北海道大学, 大学院・理学研究科, 教授 (80197152)
• 研究分担者: 大西 淳之 北海道大学, 大学院・理学研究科, 助手 (40261276)
• キーワード: 哺乳類 / 排卵 / プロテアーゼ / 卵巣 / 卵胞

研究概要

哺乳類の排卵は種々のホルモンの作用により誘起され複雑な生物現象である。この過程は卵巣を包む固い外皮が消化(卵胞壁溶解)され成熟した卵母細胞が放出されることでクライマックスを迎える。この過程は、tPAによるプラスミノゲンの活性化→プラスミンによる前駆体コラゲナーの活性化→卵胞壁溶解というプロセスで進むと考えられている。しかし最近になって、tPAは不活性前駆体で分泌されることが示されたことから、排卵を間近に控えた卵胞にはtPA活性化酵素が存在するであろうと考えられるようになり、その探索と同定が待たれていた。当研究室では、tPA活性化酵素の候補となり得る酵素としてフォリプシンを見出した。
平成8年度では、ブタ卵巣の卵胞液から単離されたセリンプロテアーゼ(フォリプシン)の活性化機構を解明することを試みた。本酵素の精製過程で得られるクロマトグラフィーの各ステップでトリプシン消化の効果を検討したところ、顕著にフォリプシン様活性の増大する分画があることが判明した。詳しい生化学的解析により、トリプシンで活性化を受ける酵素がフォリプシンそのものであることを証明した。さらにブタ卵胞液から一本鎖型の不活性前駆体フォリプシンの単離にも成功した。また同じ卵胞液には、不活性フォリプシン前駆体を二本鎖の活性型フォリプシンへと変換できる酵素(フォリプシン活性化酵素)が含まれていることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Kihara, T.: "Identification and activation of profollipsin, a latent precursor of porcine follipsin" Eur.J.Biochem.(印刷中). (1997)
• [文献書誌] Takahashi, T.: "Prolyl endopeptidase from the follicular fluid of porcine ovary : comporison with the liver ezyme" Biomed.Res.17・6. 435-442 (1996)
• [文献書誌] Takahashi, T.: "Follipsin, Academic Press" The Handbook of Proteolytic Enzymes (Barrett, A.J.and Woessner, F., Jr., eds)、Academic Press. (印刷中). (1997)
• [文献書誌] Takahashi, T.: "Proteases involved in follicle rupture during ovulation" J.Reprod.Develop.(印刷中). (1997)