内因性好中球活性化因子の検索とそれによる生体防御機構の解明

1997 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08878096
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 向井 秀仁 筑波大学, 応用生物化学系, 講師 (20251027)
• キーワード: 好中球 / 白血球 / 生体防御機構 / 免疫系 / リソゾーム酵素 / エキソサイトーシス / 分泌 / Gタンパク質

研究概要

生体には個体としての恒常性、ひいては生命を維持するために様々な防御機構が存在している。本研究は、この生体防御機構において中心的な役割を担っている白血球の一つである好中球の機能を調節する内因性因子を単離し、好中球の関与する生体防御機構を明らかにすることを目的とし、ブタ心臓より順次好中球活性化ペプチドの精製を行なってきた。その結果、異なる8種のペプチド性好中球活性化物質を単離しその構造解析を行ない、7種のペプチドの構造を決定し、また残りの1種についてもその配列を決定した。これらはすべて既知のタンパク質、特にミトコンドリア由来のタンパク質の断片であった。さらに単離したペプチドのうちブタcytochrome c oxidase subunit VIIIのC末端22残基と考えられるペプチド(ブタにおける配列はまだ決定されておらず、ウシとの相同性があることから)COSP-1、およびcytochrome bのN端末15残基のペプチド、fCyt b(1-15)についてはこれらを化学合成し、合成ペプチドを用いて実際ヒト好中球を活性化することを確認した。これらの結果は、細胞が死にいたる、あるいは大きな傷害を被ったとき、cytochrome c oxidaseやcytochrome bのような普段は細胞外に放出されることのないタンパク質が漏出、それが細胞外に存在する分解酵素によって分解、あるいは細胞内で分解、放出されることによって好中球活性化因子となり、これに向かって好中球が遊走し活性化され異物となった死細胞を処理するという生体防御系が存在する可能性を示していると考えられ、現在アポトーシスあるいはネクローシスを起こした細胞が実際にこのようなタンパク質を細胞外に放出しているかどうか検討しているところである。

研究成果

• [文献書誌] Fukuhara,S., Mukai,H., Munekata,E.: "Identification of neurokinin receptor types and intracellular signal tranducation induced by them in the murine neuroblastoma C1300 cell line." Peptide Chemistry. 1996. 282-292 (1997)
• [文献書誌] Fukuhara,S., Mukai,H., Munekata,E.: "Activin A and all-trans-retinoic acid cooperatively enhanced the functional activity of L-type Ca^<2+> channels in the neuroblastoma C1300 cell line." Biochem.Biophys.Res,Commun.241. 363-368 (1997)
• [文献書誌] Tanaka,T., Kohno,T., Kinoshita,S., Mukai,H., et al.: "α-Helix content of G proteinα subunit is decreased upon by receptor mimetics." J.Biol.Chem.273. 3247-3252 (1998)