• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2009 年度 実績報告書

ナノ・マイクロ操作技術を用いたDNA修復蛋白質の一分子解析

研究課題

研究課題/領域番号 08J02017
研究機関大阪大学

研究代表者

新田 英之  大阪大学, 産業科学研究所, 特別研究員(PD)

キーワード一分子計測 / マイクロ・ナノ操作技術 / DNA修復酵素
研究概要

これまでFree Rotation Magnetic Tweezers(以下FRMT)により相同組み換えたんぱく質であるRad51の2本鎖DNAへの重合過程を蛋白質一分子レベルで測定することに成功していた。今年度はたんぱく質1分子当たりのDNAをねじる角度に関してさらに多くのデータを集め、統計的な解析をすることにより1分子あたりのねじり角度65度を割り出した。またRad51は1分子ごとにDNAに重合すること、75-100nM以下のたんぱく質濃度では重合が開始しないことなどもわかった。この一分子ずつ付着するメカニズムは多分子で重合する場合よりも、フィラメントに欠陥ができる確率を減らすことができるメカニズムである。これらの結果をもとにして出筆した論文を国際学会誌に提出した。その後査読結果のレフリーのコメントにもとづき、DNAに固定したビーズの逆回転運動がたんぱく質のDNAからの乖離であるという主張を補足するため、ATPとRad51でフィラメントを形成した後にADP溶液で置き換える、ないしATPもADPも存在しない溶液で置き換える実験を行った。その結果、ATPもADPも存在しない溶液ではDNAに固定されたビーズの逆回転が見られたのに対し、ADP存在下では逆回転が見られなかった。これは少なくともフィラメントがADPを放出しない限りはたんぱく質がDNAから乖離しないことを意味する。これらの実験結果を含めたことにより論文が採択された。また国内の学会においてもこれらの成果を発表した。今後はこれらのたんぱく質がDNAをねじる際に出すトルクのより精密な計測に焦点を絞る予定である。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2009

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Direct observation of twisting steps during Rad51 polymerization on DNA2009

    • 著者名/発表者名
      Hideyuki Arata, Aurelie Dupont, Judith Mine, Ludovic Disseau, Axelle Renodon-Corniere, Masayuki Takahashi, Jean-Louis Viovy, Giovanni Cappello
    • 雑誌名

      Proceedings of national academy of science 106巻

      ページ: 19239-19244

    • 査読あり
  • [学会発表] Rad51の重合によるDNAねじり運動の実時間計測2009

    • 著者名/発表者名
      Hideyuki Arata, Aurelie Dupont, Judith Mine, Ludovic Disseau, Axelle Renodon-Corniere, Masayuki Takahashi, Jean-Louis Viovy, Giovanni Cappello
    • 学会等名
      日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      アスティ徳島(徳島県)
    • 年月日
      2009-10-30

URL: 

公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi