安全かつ有効な蛋白質性医薬品の創製を目指したTNF阻害薬の開発

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 08J03919
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 野村 鉄也 大阪大学, 薬学研究科, 特別研究員(DC2)
• キーワード: TNF / 自己免疫疾患 / TNFR1指向性アンタゴニスト / ファージ表面提示法 / 遺伝子シャッフリング法

研究概要

私は、自己免疫疾患の発症や悪化に関与することが知られている腫瘍壊死因子(TNF)に着目し、安全かつ有効な治療薬の開発を目指し研究を進めてきた。前年度までに、私は2種類存在するTNFのレセプターTNFR1およびTNFR2のうち、主に炎症反応の惹起に関わるTNFR1の作用を選択的に阻害できるTNFR1指向性アンタゴニストを開発し、TNF関連疾患に対する有効性を示してきた。そこで本年度は、こうした蛋白質性の医薬品候補を、より有効性と安全性に優れた医薬品として分子設計しようと考え、まず創薬基盤技術の開発を試みた。TNFは、先述のように2種類のレセプターを介して、宿主免疫応答を司ることが知られている。そのため、これまでの抗TNF療法では、両TNFレセプターを介した機能を全て遮断してしまうが故に、免疫力の低下を招いてしまい、易感染性や易発がん性といった副作用を招くことも報告されている。従って、TNFR1に対する選択性の向上、即ち蛋白医薬への優れた選択性の付与は、治療薬としての薬効の増強や投与量の低減だけではなく、副作用のリスクをも低下させることにつながる。そこでまず、私はこれまでに独自に開発してきたファージ表面提示法によるアミノ酸改変技術の更なる効率化をはかるために、遺伝子シャッフリング法を取り入れた機能性人工蛋白質創出技術を開発した【Biochem.Biophys.Res.Commun,2009.】。さらにその技術を適応して、更なるレセプター選択性に優れたTNFR1指向性アンタゴニストの開発を試みた。
その結果、TNFR1に対する結合選択性および作用選択性に優れた新規アンタゴニストの創出に成功した【Pharmazie,2010.】。このように、私は独自に開発した創薬技術を駆使して、自己免疫疾患治療薬としての医薬価値に優れた医薬品候補を創出することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] I型TNF受容体選択的アンタゴニストの創出とその自己免疫疾患治療薬としての可能性 (2010)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Yoshioka Y., Nakagawa S., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Yakugaku Zasshi 130(1) ページ: 63-68
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creation of an improved mutant TNF with TNFR1-selectivity and antagonistic activity by phage display technology (2010)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Kamada H., Inoue M., Kawara T., Arita S., Furuya T., Yoshioka Y, Shibata H., Kayamuro H., Yamashita T., Nagano K., Yoshikawa T., Mukai Y., Nakagawa S., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Pharmazie 65(2) ページ: 93-96
  • 査読あり
• [雑誌論文] Arsenic trioxide inhibits human t cell-lymphotropic virus-1-induced syncytiums by down regulating gp46 (2009)
  • 著者名/発表者名: Nabeshi H., Yoshikawa T., Kamada H., Shibata H., Sugita T., Abe Y., Nagano K., Nomura T., Minowa K., Yamashita T., Itoh N., Yoshioka Y., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Biological & Pharmaceutical Bulletin 32(7) ページ: 1286-1288
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fast Binding Kinetics and Conserved 3D Structure Underlie the Antagonistic Activity of Mutant TNF : Useful Information for Designing Artificial Proteo-Antagonists (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y., Nakamura T., Yoshioka Y., Shibata H., Abe Y., Nomura T., Taniai M., Ohta T., Nakagawa S., Tsunoda SI., Kamada H., Yamagata Y., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Journal of Biochemistry 146(2) ページ: 167-172
  • 査読あり
• [雑誌論文] The use of a mutant TNF-α as a vaccine adjuvant for the induction of mucosal immune responses (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayamuro H., Abe Y., Yoshioka Y., Katayama K., Nomura T., Yoshida T., Yamashita K., Yamashito T., Yoshikawa T., Kawai Y., Mayumi T., Hiroi T., Itoh N., Nagano K., Kamada H., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Biomaterials 30(29) ページ: 5869-5876
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel protein engineering strategy for creating highly receptor-selective mutant TNFs (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Kamada H., Inoue M., Kawara T., Arita S., Furuya T., Yoshioka Y., Shibata H., Kayamuro H., Yamashita T., Nagano K., Yoshikawa T., Mukai Y., Nakagawa S., Taniai M., Ohata T., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 388(4) ページ: 667-671
  • 査読あり
• [雑誌論文] The treatment of established murine collagen-induced arthritis with a TNFR1-selective antagonistic mutant TNF (2009)
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Yoshioka Y., Abe Y., Ohkawa A., Nomura T., Minowa K., Mukai Y., Nakagawa S., Taniai M., Ohta T., Kamada H., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Biomaterials 30(34) ページ: 6638-6647
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of mouse macrophages expressing membrane-bound TNF variants with selectivity for TNFR1-or TNFR2
  • 著者名/発表者名: Shibata H., Abe Y., Yoshioka Y., Nomura T., Sato M., Kayamuro H., Kawara T., Arita S., Furuya T., Nagano K., Yoshikawa T., Kamada H., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Cytokine (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Therapeutic effect of PEGylated TNFR1-selective antagonistic mutant TNF in experimental autoimmune encephalomyelitis mice
  • 著者名/発表者名: Nomura T., Abe Y., Kamada H., Shibata H., Kayamuro H., Inoue M., Kawara T., Arita S., Furuya T., Yamashita T., Nagano K., Yoshikawa T., Yoshioka Y., Mukai Y., Nakagawa S., Tsunoda SI., Tsutsumi Y
  • 雑誌名: Journal of Controlled Release (in press)
  • 査読あり
• [学会発表] TNFR1-selectivity improvement of mutant TNF with antagonistic activity (2009)
  • 著者名/発表者名: Tetsuya Nomura, Yasuhiro Abe, Masaki Inoue, Yasuo Yoshioka, Hiroyuki Kayamuro, Yohei Mukai, Madoka Taniai, Tsunetaka Ohta, Shinsaku Nakagawa, Haruhiko Kamada, Shin-ichi Tsunoda, Yasuo Tsutsumi
  • 学会等名: 8th Joint Conference of The Society of Leukocyte Biology, International Cytokine Society, & International Society for Interferon and Cytokine Research
  • 発表場所: Lisbon(Portugal)
  • 年月日: 2009-10-20
• [学会発表] 自己免疫疾患に対する有効性および安全性の向上を目指したTNFR1指向性アンタゴニストの改変 (2009)
  • 著者名/発表者名: 野村鉄也, 阿部康弘, 吉岡靖雄, 萱室裕之, 向洋平, 中川晋作, 角田慎一, 堤康央
  • 学会等名: 第25回DDS学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-07-03
• [学会発表] Development of a novel method using phage display, gene shuffling and improved receptor selectivity to produce mutant TNFs (2009)
  • 著者名/発表者名: Tetsuya Nomura, Yasuhiro Abe, Yasuo Yoshioka, Hiroyuki Kayamuro, Hiroko Shibata, Yohei Mukai, Shin-ichi Tsunoda, Yasuo Tsutsumi
  • 学会等名: 12th International TNF conference
  • 発表場所: Madrid/San Lorenzo de E1 Escorial(Spain)
  • 年月日: 2009-04-27